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門(mén)冬酰胺酶—蛋白質(zhì)含量的測(cè)定—氮測(cè)定法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 門(mén)冬酰胺酶—蛋白質(zhì)含量的測(cè)定—氮測(cè)定法
方法名稱(chēng):
門(mén)冬酰胺酶—蛋白質(zhì)含量的測(cè)定—氮測(cè)定法
應(yīng)用范圍:

本方法采用滴定法測(cè)定門(mén)冬酰胺酶中蛋白質(zhì)含量。

本方法適用于門(mén)冬酰胺酶。

方法原理:
供試品照氮測(cè)定法測(cè)定,用硫酸滴定液滴定,根據(jù)滴定液使用量,計(jì)算蛋白質(zhì)的含量。
試劑:

1. 硫酸鉀

2. 硫酸銅

3. 硫酸

4. 40%氫氧化鈉溶液

5.

6. 2%硼酸溶液

7. 硫酸滴定液(0.05mol/L)

8. 甲基紅-溴甲酚綠混合指示液

9. 基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉

儀器設(shè)備:
試樣制備:

1. 40%氫氧化鈉溶液

取氫氧化鈉40g,加水100mL使溶解。

2. 2%硼酸溶液

取硼酸2g,加水100mL使溶解。

3. 硫酸滴定液(0.05mol/L)

配制:取硫酸3mL,緩緩注入適量水中,冷卻至室溫,加水稀釋至1000mL,搖勻。

標(biāo)定:取在270~300℃干燥至恒重的基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉約0.15g,精密稱(chēng)定,加水50mL使溶解,加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由綠色轉(zhuǎn)變?yōu)樽霞t色時(shí),煮沸2分鐘,冷卻至室溫,繼續(xù)滴定至溶液由綠色變?yōu)榘底仙C?mL硫酸滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于5.30mg的無(wú)水碳酸鈉。根據(jù)本液的消耗量與無(wú)水碳酸鈉的取用量,算出本液的濃度。

4.甲基紅-溴甲酚綠混合指示液

取0.1%甲基紅的乙醇溶液20mL,加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30mL,搖勻。

操作步驟:

精密稱(chēng)取供試品約20mg,照氮測(cè)定法(附錄D第二法)將結(jié)果乘6.25,即得。

注:“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

參考文獻(xiàn):

中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部,p.31。

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