阿桔片－嗎啡－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定阿桔片中嗎啡的含量。

供試品加5%醋酸溶液適量，超聲使嗎啡溶解，濾過(guò)，取續(xù)濾液置固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9，搖勻，待溶劑滴盡后，用水20mL沖洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5mL量瓶收集洗脫液至刻度，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)220nm處檢測(cè)嗎啡的峰面積，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸二氫鉀溶液(0.05mol/L)

3. 庚烷磺酸鈉水溶液(0.0025mol/L)

4. 甲醇

5. 20%甲醇

6. 5%醋酸溶液

7. 氨水溶液(pH值約為9)

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按嗎啡峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 0.0025mol/L庚烷磺酸鈉水溶液 乙腈=2 2 1

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm

2.3 柱溫：室溫

取水適量，滴加氨試液至pH9。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取嗎啡對(duì)照品適量，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1mL中約含嗎啡0.06mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3:1)15mL與水5mL沖洗，再用pH值約為9的氨水溶液沖洗至流出液pH值約為9，待用。取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約1片量，置磨口錐形瓶中，精密加5%醋酸溶液10mL，超聲處理20分鐘使嗎啡溶解，取出，放至室溫，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1mL，置上述固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9，搖勻，待溶劑滴盡后，用水20mL沖洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5mL量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.282。