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青霉素V鉀片-青霉素V鉀-高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 青霉素V鉀片-青霉素V鉀-高效液相色譜法
方法名稱:
青霉素V鉀片-青霉素V鉀-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測定青霉素V鉀片中青霉素V鉀的含量。

本方法適用于青霉素V鉀片。

方法原理:

供試品經(jīng)pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并定量稀釋,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長268nm處檢測青霉素V鉀的峰面積,計算出其含量。

試劑:

1. 乙腈

2. 冰醋酸

3. pH6.5磷酸鹽緩沖液

4. 氫氧化鈉試液

儀器設(shè)備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按青霉素V鉀峰計算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:水 乙腈 冰醋酸=65 35 1

2.2 檢測波長:268nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. pH6.5磷酸鹽緩沖液

取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液125mL,加水250mL,混勻,用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH至6.5,再用水稀釋至500mL。

2. 氫氧化鈉試液

取氫氧化鈉4.3g,加水使溶解成100mL。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取青霉素V鉀對照品約50mg,置50mL量瓶中,用pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度,搖勻,即為對照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

取供試品10片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于青霉素V鉀50mg),置50mL量瓶中,用pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度,搖勻,取續(xù)濾液,即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長268nm處測定青霉素V鉀(C16H18N2O5S)的峰面積,計算出其含量。每1mg的C16H18N2O5S相當(dāng)于1695青霉素V單位。

參考文獻:

中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,二部,p.311。

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