酚咖片—對(duì)乙酰氨基酚與咖啡因的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定酚咖片中對(duì)乙酰氨基酚（C₈H₉NO₂)與咖啡因（C₈H₁₀N₄O₂)的含量。

本方法適用酚咖片。

將供試品精密加入內(nèi)標(biāo)溶液，加流動(dòng)相適量溶解并定量稀釋。搖勻，過(guò)濾，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處檢測(cè)對(duì)乙酰氨基酚與咖啡因和內(nèi)標(biāo)苯甲酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 冰醋酸

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，對(duì)乙酰氨基酚與咖啡因峰與內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 水 冰醋酸= 28 69 3

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱(chēng)取供試品

取本品20片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚0.25g)，置100mL量瓶中。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品與咖啡因?qū)φ掌愤m量，置同一量瓶中，加甲醇-冰醋酸（95:5)溶解并定量稀釋制成每1mL含2.5mg與0.3mg的溶液，搖勻，精密量取續(xù)濾液2mL置50mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5mL，加甲醇-冰醋酸（95:5)稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取苯甲酸適量，加甲醇稀釋制成每1mL含3.5mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加入甲醇-冰醋酸（95:5)約75mL，振搖30分鐘使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2mL置50mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5mL，加甲醇-冰醋酸（95:5)稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚與咖啡因及內(nèi)標(biāo)苯甲酸的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算對(duì)乙酰氨基酚與咖啡因的含量，即得。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.651。