方法名稱:
注射用雙黃連(凍干)—綠原酸和咖…" />
方法名稱: |
注射用雙黃連(凍干)—綠原酸和咖啡酸的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定注射用雙黃連(凍干)中綠原酸和咖啡酸的含量。 本方法適用于中藥制劑注射用雙黃連(凍干)。 |
方法原理: |
供試品于容量瓶中,用含內(nèi)標物的流動相溶液溶解定容,過濾,濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長274nm處檢測綠原酸和咖啡酸的吸收值,計算出其含量。 |
試劑: |
1.甲醇(色譜純) 2 .醋酸 3. 磷酸氫二鈉 4 .水楊酸 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 ERC-ODS-1161色譜柱(100×6mm)。 1.3 紫外吸收檢測器 2 色譜條件 2.1 流動相:甲醇 10%磷酸氫二鈉的醋酸緩沖液(取磷酸氫二鈉1.43g,加入醋酸4.58mL后,用水稀釋至1000mL,即得pH=2.7的磷酸氫二鈉的醋酸緩沖液)= 10 90 2.2 內(nèi)標物:水楊酸 2.3 檢測波長:274nm 2.4柱溫:55℃ |
試樣制備: |
1. 稱取供試品 精密稱取本品粉末(過五號篩-80目)試樣10mg。 2. 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸和咖啡酸各10mg,分別于100mL量瓶中,用甲醇溶解定容,即配成100mg/L的標準溶液,作為對照品儲備溶液。 3. 標準溶液的制備 取綠原酸的儲備液,用甲醇稀釋100倍,配成濃度為1mg/L的溶液,然后分別取稀釋液0.1,0.5,1,2mL,減壓下?lián)]去溶媒,加入含有內(nèi)標物的流動相1mL,充分溶解后作為綠原酸的標準溶液。 另取咖啡酸的儲備液,用甲醇稀釋200倍,配成濃度為0.5mg/L的溶液,然后分別取稀釋液0.4, 1,2,4mL,減壓下?lián)]去溶媒,加入含有內(nèi)標物的流動相1mL,充分溶解后作為咖啡酸的標準溶液。 4.供試品溶液的制備 將供試品置于10mL容量瓶中,用含內(nèi)標物的流動相溶液溶解并稀釋至刻度,過濾,取續(xù)濾液為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1. 標準曲線繪制 精密吸取上述標準溶液20μL注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長274nm處測定綠原酸和咖啡酸的吸收值,以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線,進行線性回歸,得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取上述供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長274nm處測定綠原酸和咖啡酸的吸收值,計算出其含量。 |
參考文獻: |
何心,石春偉,蘆秋萍等. 高效液相色譜法測定雙黃連粉針中綠原酸和咖啡酸的含量. 藥物分析雜志,1997,17(6):410-411. |