方法名稱： |
六味地黃丸-沒食子酸測定-高效毛細(xì)管電泳法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效毛細(xì)管電泳法測定六味地黃丸中沒食子酸的含量。 本方法適用于中成藥六味地黃丸。 |
方法原理： |
供試品粉碎后,加95%乙醇浸泡,加熱回流提取,過濾,用高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長271nm處檢測沒食子酸的吸收值，計算其含量。 |
試劑： |
1. 硼砂 2. 95%乙醇 3. 沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效毛細(xì)管電泳儀 1.2 色譜柱 未涂層熔硅彈性石英毛細(xì)管內(nèi)徑75μm;，柱長60cm，有效柱長45cm。 1.3紫外吸收檢測器 2 色譜條件 2.1緩沖鹽：20mmol/L硼酸鹽 2.2檢測波長：271nm 2.3 重力進(jìn)樣(10cm×5S) 2.4運(yùn)行電壓:20KV 2.5 電泳溫度：20℃ |
試樣制備： |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取沒食子酸對照品19.5mg于25mL量瓶中,用95%乙醇溶解并稀釋至刻度,作為對照品溶液。 精密吸取沒食子酸對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0ml于5ml量瓶中，各加入肉桂酸內(nèi)標(biāo)液1ml，95%乙醇溶液定容至刻度。 2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 稱取肉桂酸對照品9.6mg,用95%乙醇溶解并稀釋至25mL,作為內(nèi)標(biāo)溶液。 3. 供試品溶液的制備 取六味地黃丸粉碎后,稱取粉末5g,加95%乙醇50mL,浸泡12h, 100℃加熱回流提取2h,過濾,濾渣重復(fù)提取2次,合并提取液,減壓濃縮至10mL,取該溶液2mL,加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL,95%乙醇稀釋至5mL,作為供試品。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 依法進(jìn)樣測定，,以沒食子酸對照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值對其濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算線性回歸方程。得Y=-0.016X 0.1333，r=0.9993；線性范圍為15.6～312mg/L。 2. 樣品測定 取供試品溶液，依法進(jìn)樣測量，記錄各組份峰面積值，計算沒食子酸的含量。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 |
參考文獻(xiàn)： |
趙新峰，王偉，孫毓慶，毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測定山茱萸及六味地黃丸中沒食子酸含量，沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2003，20（1)：32～34 |
