方法名稱： |
明目地黃丸－熊果酸的測(cè)定－薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用薄層掃描法測(cè)定明目地黃丸中熊果酸的含量。 本方法適用于中成藥明目地黃丸。 |
方法原理： |
供試品經(jīng)提取，點(diǎn)樣，展開，用薄層掃描儀進(jìn)行雙波長(zhǎng)反射法鋸齒掃描， λＳ=541nm，λＲ=700nm測(cè)量熊果酸吸收度積分值，計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 氯仿 2. 石油醚 3. 醋酸乙酯 4. 冰醋酸 5. 乙醇 6. 環(huán)已烷 7. 硫酸 8. 乙醚 9. 熊果酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 薄層掃描儀 1.2點(diǎn)樣器 定量毛細(xì)管，一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。 1.3展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。 1.4吸附劑 硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。 2 實(shí)驗(yàn)條件 2.1薄層板：以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板，厚度0.5mm。 2.2展開劑：環(huán)已烷＋氯仿＋醋酸乙酯＋冰醋酸＝20＋5＋8＋0.5。 2.3 展開距離： 8cm。 2.4 定位：10%硫酸乙醇溶液顯色確定斑點(diǎn)位置。 2.5 掃描方式：反射鋸齒掃描，Sx=3，狹縫0.4mm×0.4mm。 2.6 掃描波長(zhǎng)：測(cè)定波長(zhǎng)540nm，參比波長(zhǎng)700nm。 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 取熊果酸對(duì)照品，精密稱定，加無(wú)水乙醇制成每ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取供試品小蜜丸或大蜜丸18g，或水蜜丸10g，陰性對(duì)照品18g精密稱定，加水50mL，放置使溶散，濾過(guò)藥渣再用水80mL洗滌，在室溫干燥至呈松軟的粉末狀，在100℃烘干，連同濾紙一并置索氏提取器內(nèi)，加乙醚適量，加熱回流提取4h，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)檬兔?30～60℃)浸泡2次，20mL/次(浸泡約2min)傾去石油醚，殘?jiān)舆m量無(wú)水乙醇-氯仿(3∶2)混合液，微熱使溶解，定量移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μL，點(diǎn)于維素鈉為粘合劑薄層板上，按上述條件展開，晾干，顯色，掃描，以熊果酸的量(μg)對(duì)峰面積求得回歸方程Y=19385.4X-178，r=0.9997；線性范圍為1.02～5.10μg。 2.供試品含量測(cè)定 精密吸取供試品溶液5μL，對(duì)照品溶液2μL與5μL，分別交叉點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑硅膠G薄層板上按上述條件展開，顯色后掃描測(cè)定，計(jì)算其含量。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
參考文獻(xiàn)： |
孫曉菊，胡軍林，雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定明目地黃丸中熊果酸的含量，時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2001，12（12)：1078～1079。 |
