益元散—甘草酸的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定益元散中甘草酸的含量。

本方法適用于中藥制劑益元散。

供試品用57%甲醇冷浸法提取益元散中的甘草酸，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外檢測器檢測甘草酸的吸收值，計算出其含量。

1.無水甲醇

2.冰醋酸

3.甘草酸銨鹽對照品

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

島津PC8 柱( 4 mm ×250 mm ):

1.3 紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 醋酸 = 57.0 42.6 0.4

2.3柱溫：40 ℃

2.4紫外檢測波長254 nm

2.5 流速：2.0mL/min

1. 稱取供試品

精密稱取本品適量，（相當于甘草藥材)0.3g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取甘草酸銨鹽對照品0. 2000 g, 以甲醇熱溶, 置100 m l 容量瓶定容至刻度。

3. 標準溶液的制備

精確吸取甘草酸銨鹽對照液0. 5m l、1m l、2m l、3m l、4m l、5m l 分別置于5m l 容量瓶中, 用流動相定容搖勻，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置具塞錐形瓶中，以60 m L 57 % 甲醇溶液冷浸提取8 h, 離心分離10 min (3000 rpm ) , 吸取上清液經(jīng)G4 砂芯漏斗抽濾, 濾液置100 m l 容量瓶中, 加57 % 甲醇溶液稀釋至刻度備用，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 標準曲線的繪制

精密吸取上述標準溶液5μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度，計算出其含量。

杜學勤，劉煥蓉，鄧并，HPLC測定冷浸法提取中成藥中的甘草酸含量，山西大學學報(自然科學版)，2002，25 (1)：48-51。