方法名稱： |
清開(kāi)靈注射液－膽酸的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定清開(kāi)靈注射液中膽酸的含量。 本方法適用于中成藥清開(kāi)靈注射液。 |
方法原理： |
本品加乙酸乙酯振搖提取，蒸干乙酸乙酯液，取上清液加甲醇稀釋，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)238nm處檢測(cè)膽酸的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 乙腈 2. 甲醇 3. 磷酸 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按膽酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2色譜條件 2.1流動(dòng)相：乙腈 水＝10 90 2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm 2.3柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密量取本品20mL，為供試品。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取膽酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含30mg的溶液。 3. 供試品溶液的制備 精密量取本品20mL，置具塞錐形瓶中，精密加入磷酸溶液（1→3)1mL，置2~10℃放置1小時(shí)，取出，放至室溫，離心（每分鐘3000轉(zhuǎn))20分鐘，精密量取上清液5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)238nm處測(cè)定膽酸（C17H24O10)的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p610 |
