清開(kāi)靈口服液—氮的測(cè)定—氮測(cè)定法

本方法采用氮測(cè)定法測(cè)定清開(kāi)靈口服液中氮的含量。

本方法適用于中成藥清開(kāi)靈口服液。

蛋白質(zhì)等含氮有機(jī)化合物與含硫酸鉀、硫酸銅的硫酸溶液加熱時(shí)，氮被還原為氨，以硫酸銨形式溶于硫酸中。反應(yīng)完畢后，加氫氧化鈉使溶液呈堿性，氨被游離，加熱蒸餾時(shí)，氨與水蒸汽共同餾出，溶于硼酸接收液中，可用硫酸滴定液滴定氨的量，從而換算成氮的含量。

1.硫酸

2.40%氫氧化鈉溶液

3. 30%硫酸銅溶液

4.2%硼酸溶液

5.甲基紅指示液

6.甲基紅—溴甲酚綠混合指示液

7.硫酸滴定液 (0.05mol/L)

1 設(shè)備

1.1 凱氏燒瓶 30~50mL

1.2 圓底燒瓶 1000 mL

1.3 氮?dú)馇?/P>

1.4 錐形瓶 100 mL

取甲基紅0.1g，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液7.4 mL使溶解，再加水稀釋至200 mL。

2. 甲基紅—溴甲酚綠混合指示液

取0.1%甲基紅的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30mL，搖勻。

3. 硫酸滴定液 (0.05mol/L)

取硫酸3.0mL緩緩注入適量水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000mL, 搖勻。

標(biāo)定：精密稱取在270-300⁰C干燥至恒重的基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉約0.15g, 加水50mL使溶解，加甲基紅—溴甲酚綠混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由綠色轉(zhuǎn)變?yōu)樽霞t色時(shí)，煮沸2分鐘，冷卻至室溫，繼續(xù)滴定至溶液由綠色變?yōu)榘底仙�。�?mL硫酸滴定液 (0.05mol/L) 相當(dāng)于5.30mg的無(wú)水碳酸鈉。根據(jù)本液的消耗量與無(wú)水碳酸鈉的取用量，算出本液的濃度。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。

蒸餾裝置如圖。圖中A為1000mL圓底燒瓶，B為安全瓶，C為連有氮?dú)馇虻恼麴s器，D為漏斗，E為直形冷凝管，F(xiàn)為100 mL錐形瓶，G、H為橡皮管夾。

連接蒸餾裝置，A瓶中加水適量與甲基紅指示液數(shù)滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石數(shù)粒，從D漏斗加水約50mL，關(guān)閉G夾，開(kāi)放冷凝水，煮沸A瓶中的水，當(dāng)蒸氣從冷凝管尖端冷凝而出時(shí)，移去火源，關(guān)H夾，使C瓶中的水反抽到B瓶，開(kāi)G夾，放出B瓶中的水，關(guān)B瓶及G夾，將冷凝管尖端插入約50mL水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此將儀器洗滌2~3次。

精密量取本品3mL，置250mL凱式燒瓶中，加硫酸鉀（或無(wú)水硫酸鈉)—硫酸銅（10：1)0.5g、硫酸5mL，加熱至溶液盡無(wú)色，放冷，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取5mL，置干燥的30~50mL凱式燒瓶中，加硫酸鉀（或無(wú)水硫酸鈉)0.3g與30%硫酸銅溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0mL；在凱式燒瓶口放一小漏斗，并使凱式燒瓶成45°斜置，用小火緩緩加熱使溶液保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸騰至溶液成澄明的綠色后，除另有規(guī)定外，繼續(xù)加熱10分鐘，放冷，加水2mL。

取2%硼酸溶液10mL，置100mL錐形瓶中，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液5滴，將冷凝管尖端插入液面下。然后，將凱式燒瓶中內(nèi)容物經(jīng)由D漏斗轉(zhuǎn)入C蒸餾瓶中，用水少量淋洗凱式燒瓶及漏斗數(shù)次，再加入40%氫氧化鈉溶液10mL，用少量水再洗漏斗數(shù)次，關(guān)G夾，加熱A瓶進(jìn)行蒸氣蒸餾，至硼酸液開(kāi)始由酒紅色變?yōu)樗{(lán)綠色時(shí)起，繼續(xù)蒸餾約10分鐘后，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣繼續(xù)沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾。

餾出液用硫酸滴定液（0.005mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙�，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)（空白和供試品所得餾出液的容積應(yīng)基本相同，約70~75mL)校正。每1mL硫酸滴定液（0.005mol/L)相當(dāng)于0.1401mg的N。

取用的供試品如在0.1g以上時(shí)，應(yīng)適當(dāng)增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相應(yīng)地增加40%氫氧化鈉溶液的用量。