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黃芩—黃芩苷和漢黃芩苷含量測定方法—HPLC-DAD

  
方法名稱:
  黃芩—黃芩苷和漢黃芩苷含量測定—HPLC-DAD
應(yīng)用范圍:
  用于不同規(guī)格并頭黃芩的黃芩苷和漢黃芩苷含量測定
方法原理:
 本品用50%中性乙醇滲漉提取,經(jīng)液相色譜分離,在280nm、330nnm處測定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Agilen 1100 型高效液相色譜儀;G13158DAD檢測器。

色譜條件  色譜柱:Phenomenex Luna C18分析柱(25 mm×4.6mm,5μm ) ;流動(dòng)相:A相(含0.05% 醋酸銨、0.01%水的水相),B相(含0.05% 醋酸銨、0.01% 氨水的甲醇);檢測波長:330 nm (漢黃芩苷)、280nm (黃芩苷) ;體積流量:0.6mL /m in;進(jìn)樣量:20μL;柱溫:30℃。梯度洗脫: 0~10 m in (0~20% B),10~30 m in(20% B~40% B),30~45 m in (40% B~60% B),45~50 m in (60% B~100%B)。
試樣制備:
 

 對照品溶液的制備: 精密稱取黃芩苷和漢黃芩苷對照品各5mg,加色譜甲醇溶解,分別轉(zhuǎn)到50mL的量瓶定容,配成0.1mg/mL的對照品溶液,再稀釋法成含黃芩苷和漢黃芩苷均為0.01mg/mL,作為對照品溶液。

供試品溶液的制備: 分別取4種不同規(guī)格的并頭黃芩粉碎,過40 目篩;分別稱取1g,裝入微量滲漉裝置,加2.5mL50%中性乙醇浸泡1h 后,壓實(shí),再用27.5mL 50% 中性乙醇進(jìn)行滲漉,控制滲漉速度,約1 h 滲漉完,滲漉液稀釋60倍,稀釋液用0.2微孔濾膜濾過。
操作步驟:
  分別取(1)、(2)、(3)、(4) 4 個(gè)不同規(guī)格并頭黃芩的粉末的滲漉稀釋液,過0.2 微孔濾膜的溶液及對照品溶液,進(jìn)樣20μL,并分別由標(biāo)準(zhǔn)線性方程求出黃芩苷和漢黃芩苷含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.payment-defi.com)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  溫華珍,肖盛元,王義明等. HPLC法測定不同規(guī)格并頭黃芩的黃芩苷和漢黃芩苷含量. 中草藥.2005.36(4):600~602
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