公開(公告)號 | CN1952179A |
公開(公告)日 | 2007.04.25 |
申請(專利)號 | CN200610140463.3 |
申請日期 | 2006.10.09 |
專利名稱 | 一種檢測白介素-6基因啟動子區(qū)多態(tài)性位點的方法 |
主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍總醫(yī)院 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 田亞平;賈興旺;鄧心新;汪德清;董振南 |
地址 | 100853北京市復興路28號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 北京君智知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 |
代理人 | 向 華 |
國省代碼 | 北京;11 |
主權(quán)項 | 一種檢測白介素-6基因啟動子區(qū)多態(tài)性位點的方法,它包括下述步驟: (1)設(shè)計用于擴增含白介素-6基因-597G/A,-572G/C兩位點的DNA片段的引物: 正向引物:5’-AAAGGAGTCACACACTCC-3’; 反向引物:5’-GCGTTCCAGTTAATTTGTATTTG-3’; (2)設(shè)計分別用于檢測白介素-6基因啟動子區(qū)-597G/A,-572G/C兩位點的探針,并用不同的熒光素分別標記所述的兩對探針: 用于檢測白介素-6基因啟動子區(qū)-597G/A位點的探針為: 檢測探針:5’-CTGCCTGGCCACCCTCA-3’; 錨定探針:5’-LC-Red 640-TTTCGTGCAGTTACTTCAAGGCGTCTCCAGG-3’; 用于檢測白介素-6基因啟動子區(qū)-572G/C位點的探針為: 檢測探針:5’-ACAACAGCCCCTCACAGG-3’; 錨定探針:5’-LC-Red 705-GAGCCAGAACACAGAAGAACTCAGATGACTG-3’; (3)PCR擴增,并進行熒光檢測; (4)描繪熔點曲線; (5)根據(jù)得到的特征性熔點曲線,判斷待測樣品的基因型; (6)對所述的待測樣品的基因型進行測序驗證。 |
摘要 | 本發(fā)明提供了一種檢測白介素-6基因啟動子區(qū)多態(tài)性位點的方法,它運用實時熒光PCR儀結(jié)合熔點分析在同一反應(yīng)體系中實現(xiàn)了同時對白介素-6基因啟動子區(qū)-572G/C,-597G/A兩位點多態(tài)性的檢測。本發(fā)明所述的方法與直接測序的檢測方法相比,操作簡單,成本低廉,結(jié)果判斷直觀,反應(yīng)快速,并且每一反應(yīng)都是閉管進行,有效減少了PCR污染的風險。 |
國際公布 |