| 公開(公告)號 | CN1308461C |
| 公開(公告)日 | 2007.04.04 |
| 申請(專利)號 | CN200410061422.6 |
| 申請日期 | 2004.12.24 |
| 專利名稱 | 一種檢測口蹄疫病毒的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/25(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 武漢大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 鄭從義;顧潮江;屈三甫 |
| 地址 | 430072湖北省武漢市武昌珞珈山 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 武漢宇晨專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 王敏鋒 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項 | 一種檢測口蹄疫病毒的熒光定量PCR試劑盒，該試劑盒含有：a)RNA抽提液，b)逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶，c)RNA酶抑制劑，d)引物和TaqMan探針，e)標(biāo)準(zhǔn)陽性RNA模板，f)RT-PCR熒光定量反應(yīng)液，其特征是：引物序列分別為正義引物：5’-GAACACATTCTTTACACCAGGAT-3’，反義引物：5’-CATATCTTTGCCAATCAACATCAG-3’，擴(kuò)增子大小為121bp，熒光探針序列為：5′FAM-ACAACCTACCGCCGAGCCAATTC-TAMRA-3′，探針的5′端標(biāo)記熒光發(fā)射基團(tuán)FAM，靠近3’端標(biāo)以熒光淬滅基團(tuán)TAMRA，標(biāo)準(zhǔn)陽性RNA模板由已插入口蹄疫病毒3D區(qū)121bp片段的pGEM-T載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH45α，增殖后提取質(zhì)粒進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄制備RNA，并于紫外分光光度計測A260定量并10倍梯度稀釋。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種檢測口蹄疫病毒的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用，該試劑盒利用熒光探針(TaqMan)和正義引物、反義引物并直接以體外轉(zhuǎn)錄RNA標(biāo)準(zhǔn)品作為逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增的雙重對照，使得定量結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠�？筛咝Х奖愕貙Σ《疽呙绲男r進(jìn)行定量檢測和質(zhì)量監(jiān)控及對口蹄疫爆發(fā)疫情進(jìn)行實(shí)時監(jiān)控，同時可廣泛用于動物產(chǎn)品的進(jìn)出口及動物食品的安全檢測，也可為相關(guān)基礎(chǔ)研究提供技術(shù)支持，應(yīng)用前景十分廣泛。 |
| 國際公布 |
