| 公開(公告)號 | CN1297313C |
| 公開(公告)日 | 2007.01.31 |
| 申請(專利)號 | CN200410040720.7 |
| 申請日期 | 2004.09.16 |
| 專利名稱 | 減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗后處理方法 |
| 主分類號 | A61K39/13(2006.01)I |
| 分類號 | A61K39/13(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N7/04(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 褚嘉祐;姜述德;孫明波;廖國陽;張麗旌;李衛(wèi)東;俞泳霆;李平忠 |
| 地址 | 650118云南省昆明市茭菱路379號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 徐玲菊 |
| 國省代碼 | 云南;53 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗后處理方法，其特征在于采用下列工藝步驟： 1)、澄清：將大規(guī)模培養(yǎng)出來的病毒液經(jīng)過1.0-0.6μm、0.6-0.45μm、0.45-0.22μm孔徑的三級濾柱過濾、澄清，去除病毒液中的細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，并保持病毒液的無菌狀態(tài)； 2)、濃縮：將澄清過的病毒液在Millipore交叉流超濾設(shè)備中，用10萬截留分子量的超濾膜將病毒液濃縮200～400倍 3)、純化： 凝膠過濾：在Phamacia Index70層析柱中，裝Sepharose CL-6B層析填料，濃縮的病毒液用層析柱純化，即用80mmol/L磷酸鹽緩沖液洗脫，緩沖液pH7.0-7.2，紫外吸收波長280測吸收值，收集第一峰即為凝膠過濾純化的病毒液； 離子交換：在Phamacia Index100層析柱中，裝入DEAE SephasoreFast Flow層析填料，凝膠過濾純化的病毒液用層析柱純化，即用80mmol/L磷酸鹽緩沖液洗脫，緩沖液pH7.0-7.2，紫外吸收波長280測吸收值，收集第一峰即為純化的病毒液； 4)、除菌過濾：純化的病毒液用0.22μm的濾膜除菌過濾，之后加入10倍濃縮M199，使病毒液中含有原倍的M199； 5)、滅活：在過濾的病毒液中，按終濃度為1/4000加入福爾馬林滅活劑，在35-37℃溫度下滅活12-14天，每天取樣觀察，滅活至第6天時，將病毒液用0.22μm濾膜過濾至另一無菌瓶中，繼續(xù)滅活至12-14天，轉(zhuǎn)入4℃保存，即為單價(jià)半成品。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供一種減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗后處理方法，它將大規(guī)模培養(yǎng)出來的病毒液經(jīng)過1.0-0.6μm、0.6-0.45μm、0.45-0.22μm孔徑的三級濾柱過濾、澄清，超濾濃縮，柱層析純化及滅活等后處理工藝，將病毒液制備成純度高、免疫原性及安全好、質(zhì)量穩(wěn)定的合格疫苗半成品，從而滿足減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的生產(chǎn)需要。本發(fā)明可大規(guī)模處理大量的病毒液，且生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好；用本發(fā)明生產(chǎn)的疫苗半成品，無外原因子污染，細(xì)胞DNA殘留量少，滅活后的半成品經(jīng)檢查無活病毒存在，安全可靠，半成品抗原含量高，能夠滿足成品生產(chǎn)的需要；用本發(fā)明生產(chǎn)的疫苗半成品制備成Sabin IPV成品疫苗，其質(zhì)量穩(wěn)定，安全性及免疫原性良好，經(jīng)檢定全部符合國家生物制品規(guī)程的要求。 |
| 國際公布 |
