| 公開(公告)號 | CN1293195C |
| 公開(公告)日 | 2007.01.03 |
| 申請(專利)號 | CN200510097997.8 |
| 申請日期 | 2005.09.02 |
| 專利名稱 | 新城疫LaSota疫苗株反向遺傳操作系統(tǒng)及其應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12N15/86(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/86(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K39/17(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 步志高;陳化蘭 |
| 地址 | 150001黑龍江省哈爾濱市市南崗區(qū)馬端街427號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 程金山 |
| 國省代碼 | 黑龍江;23 |
| 主權(quán)項 | 一種制備負(fù)鏈RNA病毒的方法，包括以下步驟： (1)將轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染所述病毒復(fù)制許可的宿主細(xì)胞，培養(yǎng)轉(zhuǎn)染后的宿主細(xì)胞； (2)收獲上清液，過濾后繼續(xù)敏感細(xì)胞傳代或接種雞胚尿囊腔救獲病毒， 其中所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒是包含外源標(biāo)簽基因GFP的質(zhì)粒pBRN-FL-GFP3，其核苷酸序列如圖10所示， 其中所述輔助質(zhì)粒包括如下三個質(zhì)粒：包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列的質(zhì)粒、包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列的質(zhì)粒、和包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列的質(zhì)粒； 其中所述宿主細(xì)胞是穩(wěn)定表達(dá)T7聚合酶的細(xì)胞系。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種新城疫LaSota弱毒疫苗株的反向遺傳操作系統(tǒng)及其應(yīng)用，該系統(tǒng)包含：轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒，該轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒包括所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的基因組cDNA序列；一個或多個轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒，該輔助質(zhì)粒包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列、編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列、和編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列；所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的宿主細(xì)胞。通過上述反向遺傳操作系統(tǒng)，成功救獲了野生型病毒株，并且為進(jìn)一步開展新城疫病毒活載體疫苗研制及NDV病毒相關(guān)基礎(chǔ)奠定了堅實的基礎(chǔ)。 |
| 國際公布 |
