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重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子突變體及其制備方法

公開(公告)號(hào) CN1844392A  
公開(公告)日 2006.10.11  
申請(專利)號(hào) CN200610076719.9  
申請日期 2006.04.18  
專利名稱 重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子突變體及其制備方法  
主分類號(hào) C12N15/12(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2005.4.21 CN 200510066193.1  
申請(專利權(quán))人 梁亮勝  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 朱俊銘;余永恒;雷繼軍;吳海祥;張曉林;張光勛;文 力  
地址 430019湖北省武漢市江岸區(qū)黃浦大街絲寶國際大廈  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 顧晉偉;劉繼富  
國省代碼 湖北;42  
主權(quán)項(xiàng) 一種制備rhCNTF突變體的方法,包括下列步驟: (a)將rhCNTF突變體基因序列克隆入表達(dá)載體以得到重組載體,并導(dǎo)入大腸桿菌中,生成含有重組載體的基因工程菌; (b)培養(yǎng)基因工程菌至A600=12~14時(shí),加入乳糖,誘導(dǎo)rhCNTF突變體在基因工程菌中可溶性表達(dá); (c)誘導(dǎo)后,向培養(yǎng)液中緩慢加入葡萄糖作為主要碳源,并控制培養(yǎng)液中溶解值為10~15%,繼續(xù)培養(yǎng); (d)待基因工程菌的A600=20~30時(shí),收獲菌體,并將菌體破碎得到破菌液; (e)純化破菌液,得到純化產(chǎn)品。  
摘要 本發(fā)明涉及重組蛋白與其制備方法,具體涉及重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(簡稱rhCNTF)突變體及其制備方法,更具體的說,本發(fā)明涉及用乳糖誘導(dǎo)rhCNTF突變體在大腸桿菌BL21(DE3)中高效可溶表達(dá)、并從中加以分離純化的方法,以及通過該方法制備的rhCNTF突變體。  
國際公布  
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