公開(公告)號(hào)
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CN1844392A
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公開(公告)日
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2006.10.11
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申請(專利)號(hào)
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CN200610076719.9
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申請日期
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2006.04.18
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專利名稱
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重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子突變體及其制備方法
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主分類號(hào)
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C12N15/12(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2005.4.21 CN 200510066193.1
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申請(專利權(quán))人
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梁亮勝
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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朱俊銘;余永恒;雷繼軍;吳海祥;張曉林;張光勛;文 力
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地址
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430019湖北省武漢市江岸區(qū)黃浦大街絲寶國際大廈
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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顧晉偉;劉繼富
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國省代碼
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湖北;42
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主權(quán)項(xiàng)
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一種制備rhCNTF突變體的方法,包括下列步驟: (a)將rhCNTF突變體基因序列克隆入表達(dá)載體以得到重組載體,并導(dǎo)入大腸桿菌中,生成含有重組載體的基因工程菌; (b)培養(yǎng)基因工程菌至A600=12~14時(shí),加入乳糖,誘導(dǎo)rhCNTF突變體在基因工程菌中可溶性表達(dá); (c)誘導(dǎo)后,向培養(yǎng)液中緩慢加入葡萄糖作為主要碳源,并控制培養(yǎng)液中溶解氧值為10~15%,繼續(xù)培養(yǎng); (d)待基因工程菌的A600=20~30時(shí),收獲菌體,并將菌體破碎得到破菌液; (e)純化破菌液,得到純化產(chǎn)品。
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摘要
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本發(fā)明涉及重組蛋白與其制備方法,具體涉及重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(簡稱rhCNTF)突變體及其制備方法,更具體的說,本發(fā)明涉及用乳糖誘導(dǎo)rhCNTF突變體在大腸桿菌BL21(DE3)中高效可溶表達(dá)、并從中加以分離純化的方法,以及通過該方法制備的rhCNTF突變體。
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國際公布
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