| 公開(公告)號(hào) | CN1273486C |
| 公開(公告)日 | 2006.09.06 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410021844.0 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.02.17 |
| 專利名稱 | 腫瘤特異性抗原TA48及其在癌癥診斷中的應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C07K14/435(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07K14/435(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;G01N33/574(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 葉尚勉;葉尚蓉 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 葉尚勉;葉尚蓉 |
| 地址 | 610016四川省成都市梓橦街42號(hào)3單元7號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所 |
| 代理人 | 李高峽 |
| 國省代碼 | 四川;51 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種腫瘤特異性抗原，其特征在于它由以下方法制備： a)將癌細(xì)胞系或腫瘤組織進(jìn)行細(xì)胞裂解并勻漿，離心取上清液；所述癌細(xì)胞系為乳腺癌細(xì)胞株MCF-7；所述細(xì)胞裂解和勻漿在0.5％NP40，0.15MNaCl，5mMEDTA，50mMTris，1mMPMSF溶液中進(jìn)行，12000rpm離心30分鐘； b)將獲得的上清液經(jīng)離子交換層析柱分離，梯度洗脫并分步收集洗脫的蛋白部分；所述離子交換層析柱的離子交換試劑為陽離子瓊脂糖SEPHAROSE，層析柱大小為2.5×11cm，所述離子交換試劑體積2毫升；用20ml0.05MPBSPH＝7離子交換緩沖液進(jìn)行柱平衡；再將細(xì)胞裂解上清液或組織勻漿上清液上柱后，室溫下用離子交換緩沖液梯度洗脫，洗脫液用分步收集儀收集，每步洗脫液的容積為所述離子交換試劑的10倍，所有的操作均在室溫下進(jìn)行；所述每步梯度洗脫液組成為： 1).0.005MPBS(pH＝7) 2).0.028M磷酸二氫鈉溶液 3).0.05M磷酸二氫鈉溶液 4).0.175M磷酸二氫鈉溶液 5).0.3M磷酸二氫鈉溶液 6).1.0M磷酸二氫鈉溶液 7).1.0M磷酸溶液 在分步收集中每1ml分部收集洗脫液； c)將分步收集的每一分部的洗脫液與癌癥病人的血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫反應(yīng)，確定反應(yīng)呈陽性的分部，存在于第7步洗脫液的69至71段收集液； d)將c)步驟中獲得的收集液進(jìn)行進(jìn)一步純化和鑒定，獲得腫瘤特異性抗原。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種新的腫瘤特異性抗原TA48，采用液相層析分離法結(jié)合癌癥血清學(xué)的抗體捕獲酶聯(lián)免疫測(cè)定方法，從癌細(xì)胞系和腫瘤組織中分離獲得。該抗原在所有常見的癌細(xì)胞株均有表達(dá)，而在相應(yīng)的正常組織則不表達(dá)或表達(dá)低下。本發(fā)明還提供一種體外早期診斷癌癥的方法。通過測(cè)定樣本中抗腫瘤特異性抗原TA48的自身抗體的量，而判斷腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后情況。該檢測(cè)方法有95％的特異性，平均67.6％的敏感性，能夠用于各種不同類型癌癥的普查�？稍缙跈z測(cè)到在腫瘤的發(fā)生，并可對(duì)腫瘤的發(fā)展情況和預(yù)后作出評(píng)估。具有臨床應(yīng)用的良好前景。 |
| 國際公布 |
