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禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒亞單位疫苗及其生產(chǎn)方法

公開(公告)號(hào) CN1765418A  
公開(公告)日 2006.05.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510012279.6  
申請(qǐng)日期 2005.07.29  
專利名稱 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒亞單位疫苗及其生產(chǎn)方法  
主分類號(hào) A61K39/12(2006.01)I  
分類號(hào) A61K39/12(2006.01)I;A61P31/12(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 崔治中;王錫樂  
地址 271018山東省泰安市岱宗大街61號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 鄭 明  
國(guó)省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種用于預(yù)防禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒亞單位疫苗的生產(chǎn)方法,其特征是:用重組桿狀病毒以MOI值即感染倍數(shù)為2~3的量感染處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Sf9細(xì)胞,37℃培養(yǎng)4~5d,細(xì)胞膨脹變大,并有部分感染細(xì)胞懸浮于上清中后,收集細(xì)胞,經(jīng)超聲波裂解,以常規(guī)法按水相∶油相=1∶3的比例制成油乳苗,相當(dāng)于每毫升油乳苗中含有400萬感染的Sf9細(xì)胞。  
摘要 本發(fā)明涉及一種禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒亞單位疫苗的制備方法,即:利用Bac-to-BacBaculovirus Expression Systems,構(gòu)建了能表達(dá)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒(REV)囊膜糖蛋白基因(env)的重組桿狀病毒。用REV特異性單克隆抗體分別做間接免疫熒光抗體試驗(yàn)(IFA)和免疫轉(zhuǎn)印試驗(yàn),均可從感染的Sf9昆蟲細(xì)胞中檢出REV env。重組桿狀病毒感染的Sf9細(xì)胞裂解后制備成油乳疫苗免疫SPF雞后,可以誘發(fā)維持45天以上的特異性抗REV抗體,并可抵抗REV病毒感染。  
國(guó)際公布  
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