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使用擴(kuò)增后培養(yǎng)步驟擴(kuò)增和檢測靶核酸

公開(公告)號(hào) CN1309838C  
公開(公告)日 2007.04.11  
申請(專利)號(hào) CN97109620.1  
申請日期 1997.03.11  
專利名稱 使用擴(kuò)增后培養(yǎng)步驟擴(kuò)增和檢測靶核酸  
主分類號(hào) C12P19/34(2006.01)I  
分類號(hào) C12P19/34(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.3.11 US 613571  
申請(專利權(quán))人 莊臣臨床診斷有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 J·W·貝克斯;M·L·克拉馬;J·法爾沃  
地址 美國紐約  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國專利代理(香港)有限公司  
代理人 溫宏艷  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項(xiàng) 一種擴(kuò)增并測定靶核酸的方法,其包括:(a)將懷疑含所述的靶核酸的樣本與至少二種寡核苷酸和一種耐熱性的擴(kuò)增酶接觸,其中所述至少二種寡核苷酸與所述的靶核酸的一部分互補(bǔ),所用的條件使所述的靶核酸擴(kuò)增;(b)使擴(kuò)增的靶核酸變性以形成單鏈核酸;(c)作為擴(kuò)增后的培養(yǎng)步驟,在1秒鐘和30分鐘之間和95℃和120℃之間培養(yǎng)所述的樣本,使耐熱性擴(kuò)增酶失活;(d)測定是否存在所述的擴(kuò)增的靶核酸;其中耐熱性擴(kuò)增酶的失活不要求打開反應(yīng)容器。  
摘要 本發(fā)明涉及擴(kuò)增和測定靶核酸的方法。其包括將懷疑含靶核酸的樣本與一種耐熱性的DNA聚合酶和兩個(gè)引物接觸,其中所述的引物大體上是與所述的靶核酸互補(bǔ),在此條件下使靶核酸擴(kuò)增。然后擴(kuò)增的靶核酸變性形成單鏈核酸。擴(kuò)增之后,樣品進(jìn)行測定前培養(yǎng)步驟。樣品在1秒和30分鐘之間和95℃至120℃培養(yǎng)使所述的聚合劑失活。最后,測定是否存在擴(kuò)增的靶核酸。  
國際公布  
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