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用于生產(chǎn)重組多克隆蛋白質(zhì)的方法

公開(公告)號 CN1723283A  
公開(公告)日 2006.01.18  
申請(專利)號 CN200480001950.0  
申請日期 2004.01.07  
專利名稱 用于生產(chǎn)重組多克隆蛋白質(zhì)的方法  
主分類號 C12N15/10(2006.01)I  
分類號 C12N15/10(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K16/00(2006.01)I;C07K14/705(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2003.1.7 DK PA200300008;2003.1.7 US 60/438,403;2003.6.5 US 60/476,018  
申請(專利權(quán))人 西福根有限公司  
發(fā)明(設計)人 J·S·豪魯姆;F·C·維比爾格;V·W·柯爾基;J·莎倫;楊秋英  
地址 丹麥靈比  
頒證日  
國際申請 2004-01-07 PCT/DK2004/000001  
進入國家日期 2005.07.07  
專利代理機構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所  
代理人 程 泳  
國省代碼 丹麥;DK  
主權(quán)項 產(chǎn)生細胞集合的方法,所述細胞集合適合作為重組多克隆生產(chǎn)型細胞系,所述方法包括:a)提供了載體文庫,所述載體文庫包含不同核酸序列的群體,其中各所述載體包括:1)單拷貝的獨特核酸序列,所述核酸序列編碼多克隆蛋白質(zhì)的獨特成員,所述多克隆蛋白質(zhì)包含與特定抗原結(jié)合的不同成員;和2)一個或多個重組酶識別序列;b)將所述載體文庫導入宿主細胞系,其中所述宿主細胞系的各單個細胞的基因組包含重組酶識別序列,所述重組酶識別序列位于其基因組的單個特異性位點,并與載體上的重組酶識別序列匹配。c)確保在所述細胞中存在一個或更多的重組酶,以使步驟(a)中的不同核酸序列位點特異性地整合到宿主細胞系的細胞中,其中所述一個或更多的重組酶是i)由導入了所述核酸序列的所述細胞表達的;ii)由步驟a中的載體有效地編碼;iii)通過第二載體表達而提供;或iv)作為蛋白質(zhì)提供給所述細胞;和d)選擇細胞,所述細胞含有來自所述不同核酸序列的文庫的整合的拷貝。  
摘要 本發(fā)明涉及生產(chǎn)重組多克隆蛋白質(zhì)組合物,特別是重組多克隆抗體組合物的方法。所述方法包括:獲取用不同核酸序列的文庫轉(zhuǎn)染的細胞的集合,其中集合中每個細胞都由所述文庫中的一個成員轉(zhuǎn)染并且能夠表達該成員,所述成員編碼不同的結(jié)合特定抗原的多克隆蛋白質(zhì)成員并且在所述集合的個體細胞基因組內(nèi)位于相同的單一位點,其中所述核酸序列不是天然地與集合中所述細胞相聯(lián)系。對所述細胞在適合于表達所述多克隆蛋白質(zhì)的條件下進行培養(yǎng),所述多克隆蛋白質(zhì)從所述細胞或培養(yǎng)上清液中獲得。所述核酸序列通過使用用于位點特異性整合的載體文庫轉(zhuǎn)染而導入細胞內(nèi)。本發(fā)明方法適合用于生產(chǎn)重組多克隆抗體,因此可以得到優(yōu)于血漿來源治療性免疫球蛋白產(chǎn)物的替代品。  
國際公布 2004-07-22 WO2004/061104 英  
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