公開(公告)號
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CN1267551C
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公開(公告)日
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2006.08.02
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申請(專利)號
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CN99817049.6
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申請日期
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1999.10.19
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專利名稱
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重組成熟溶葡萄球菌素的表達
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主分類號
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C12N15/00(2006.01)I
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分類號
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C12N15/00(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N9/48(2006.01)I;C12N9/52(2006.01)I;C12N1/20(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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印度生物技術國際有限公司;科學及工業(yè)研究委員會
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發(fā)明(設計)人
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G·S·哈特里;R·沙馬
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地址
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印度海得拉巴
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頒證日
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國際申請
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1999-10-19 PCT/IB1999/001704
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進入國家日期
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2002.06.19
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專利代理機構
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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張廣育;孟凡宏
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國省代碼
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印度;IN
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主權項
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一種生產不含前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的成熟溶葡萄球菌素內肽酶的方法,其特征在于:(a)提供一種遺傳構建體,該構建體含有一段在編碼溶葡萄球菌素原的元件不存在的條件下編碼成熱溶葡萄球菌素內肽酶的核苷酸序列,該核苷酸序列位于表達載體中翻澤起始密碼子“ATG”的下游,和一個操作性連接在編碼成熟溶葡萄球菌素內肽酶的核苷酸序列上的T7φ10啟動子/1ac操縱子;(b)轉化宿主細胞使其含有和表達步驟(a)的遺傳構建體,這樣不含前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的成熟溶葡萄球菌素在宿主胞漿中積累;以及(c)從宿主細胞中分離出成熟溶葡萄球菌素。
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摘要
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克隆了模仿葡萄球菌(staphylococcus simulans)溶葡萄球菌素基因的一部分并且在前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原不存在的條件下在大腸桿菌胞漿中過度表達,從而產生成熟溶葡萄球菌素,其表達在IPTG誘導型啟動子和核糖體結合位點的轉錄控制下。被轉化宿主細胞的IPTG誘導在完全缺失前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的條件下產生細胞內的可溶成熟溶葡萄球菌素(27KDa)。如此形成的成熟溶葡萄球菌素不需要翻譯后修飾。如此形成的成熟溶葡萄球菌素可以用于治療和預防葡萄球菌感染。
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國際公布
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2001-04-26 WO2001/029201 英
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