公開(公告)號 | CN1244699C |
公開(公告)日 | 2006.03.08 |
申請(專利)號 | CN200310108792.6 |
申請日期 | 2003.11.21 |
專利名稱 | 糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;冈诖竽c桿菌中的高效表達 |
主分類號 | C12N15/52(2006.01)I |
分類號 | C12N15/52(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/20(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 袁中一;楊志建;蔡 謹(jǐn) |
地址 | 200031上海市岳陽路320號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
代理人 | 肖劍南 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權(quán)項 | 含有糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;富颍碅fPGA基因,及其信號肽核苷酸序列的重組表達質(zhì)粒psmlfpga,其特征在于,所述表達質(zhì)粒由trc啟動子、AfPGA基因及其信號肽核苷酸序列、四環(huán)素抗性基因和p15a復(fù)制子連接而成。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;(AfPGA)高效表達質(zhì)粒psmlfpga的構(gòu)建方法;利用該方法得到的質(zhì)粒psmlfpga轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主DH5α,得到大腸桿菌基因工程菌株CGMCC No.1023,其不需誘導(dǎo)便能高效表達AfPGA;本發(fā)明還公開了一種用于上述大腸桿菌基因工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方,其采用糊精或淀粉作為發(fā)酵培養(yǎng)基主要碳源,可以大大提高重組蛋白的生產(chǎn)率;經(jīng)搖瓶發(fā)酵,青霉素G;冈贒H5α/psmlfpga中的表達水平可達3500U/L。 |
國際公布 |