| 公開(公告)號(hào) | CN1739802A |
| 公開(公告)日 | 2006.03.01 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410096457.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.12.01 |
| 專利名稱 | 利用非人哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)乙型肝炎疫苗的方法 |
| 主分類號(hào) | A61K39/29(2006.01)I |
| 分類號(hào) | A61K39/29(2006.01)I;A61P1/16(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 青島森淼生物技術(shù)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 袁三平;鄒賢剛;張義靜;鮮 建 |
| 地址 | 266101山東省青島市株州路177號(hào)惠特工業(yè)城A區(qū)5號(hào)樓二層 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京英特普羅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 馬東曉 |
| 國(guó)省代碼 | 山東;37 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種利用非人哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)乙型肝炎疫苗的方法，其特征在于該方法包括下列步驟：(1)選用哺乳動(dòng)物的乳蛋白基因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的調(diào)控區(qū)和表達(dá)框架，在乳蛋白基因的表達(dá)框架上建立一個(gè)唯一的酶切位點(diǎn)，然后將乙肝表面抗原蛋白基因連接在乳蛋白基因的表達(dá)框架上，轉(zhuǎn)基因載體的末端再連接一個(gè)篩選基因；(2)所構(gòu)建的載體經(jīng)DNA序列分析，確定乙肝表面抗原蛋白基因與乳蛋白基因的DNA序列，并與乳蛋白基因本身的表達(dá)和功能基因的氨基酸組成一致；(3)用電穿孔或脂質(zhì)體誘導(dǎo)的方法將乙肝表面抗原蛋白基因載體轉(zhuǎn)入體細(xì)胞中；(4)在培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行篩選，獲得篩選后的陽(yáng)性細(xì)胞株；一部分細(xì)胞冷凍保存，一部分細(xì)胞用于制備DNA；(5)陽(yáng)性細(xì)胞株的DNA，經(jīng)PCR和Southern雜交分析，確定含有乙肝表面抗原蛋白基因的細(xì)胞株；(6)轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞株的細(xì)胞移入成熟的去核卵母細(xì)胞的卵周隙內(nèi)，然后使供核細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合；(7)將克隆胚胎移植到寄母羊中，獲得轉(zhuǎn)基因克隆羊；(8)檢測(cè)轉(zhuǎn)乙肝表面抗原蛋白基因動(dòng)物的乳汁中的乙肝表面抗原蛋白含量；(9)含有乙肝表面抗原蛋白的乳汁中的乙肝表面抗原蛋白的提純。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于一種利用非人哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)乙型肝炎疫苗的方法。本發(fā)明將乙肝表面抗原蛋白基因，通過(guò)轉(zhuǎn)染體細(xì)胞的方法，將乙肝表面抗原蛋白基因轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物的基因組內(nèi)，而在乳汁中特異高效表達(dá)乙肝表面抗原蛋白，從而一方面可以在飲用動(dòng)物乳汁的時(shí)候達(dá)到免疫的目的；另一方面，可以從乳汁中提取乙肝表面抗原蛋白，制備注射性免疫制劑，達(dá)到對(duì)乙型肝炎的預(yù)防和治療的目的。 |
| 國(guó)際公布 |
