| 公開(公告)號 | CN1217000C |
| 公開(公告)日 | 2005.08.31 |
| 申請(專利)號 | CN03131796.0 |
| 申請日期 | 2003.07.30 |
| 專利名稱 | 利用噬菌體展示技術展示抗原制備抗體的方法 |
| 主分類號 | C12N15/87 |
| 分類號 | C12N15/87;C12P21/08;C12P21/00;C07K16/18;C07K16/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國藥科大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 沈子龍;吳國球 |
| 地址 | 210038 江蘇省南京市童家巷24號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 南京知識律師事務所 |
| 代理人 | 胡錫瑜 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權項 | 一種用噬菌體展示技術展示人心肌肌鈣蛋白I抗原及其抗原表位的方法，其特征在于將人心肌肌鈣蛋白I基因插入pIII型噬菌體展示載體多克隆位點，該載體具有LacZ啟動子-Pelb引導序列-XcmIPCR產物克隆位點及多克隆位點-M13噬菌體包膜蛋白III基因部分序列；將人心肌肌鈣蛋白I基因插入載體的多克隆位點，經IPTG誘導表達，在Pelb的引導下定位于細胞周質腔，用輔助噬菌體VCSM13超感染，利用噬菌體自我包裝機制，將人心肌肌鈣蛋白I展示于噬菌體顆粒尾部；同時，將人心肌肌鈣蛋白I抗原表位即cTnI95-108基因插入pVIII型噬菌體展示載體多克隆位點，該載體具有LacZ啟動子-多克隆位點-M13噬菌體包膜蛋白VIII基因部分序列，插入載體內的cTnI95-108經IPTG誘導表達，用輔助噬菌體VCSM13超感染，利用噬菌體自我包裝機制，將cTnI95-108展示于噬菌體顆粒表面。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于基因工程技術領域。利用噬菌體展示技術原理將外源抗原基因與絲狀噬菌體III基因蛋白融合展示于噬菌體顆粒尾部，將抗原表位與絲狀噬菌體VIII基因蛋白融合展示于絲狀噬菌體顆粒表面。用展示有外源抗原及抗原表位的噬菌體顆粒為免疫原制備抗體。該技術拓寬了噬菌體展示技術的應用范圍，同時也為抗體的制備提供了新途徑。保護范圍：1.一種用噬菌體展示技術展示抗原用以制備單克隆抗體及多克隆抗體的方法。2.一種用噬菌體展示技術展示人心肌肌鈣蛋白抗原及其抗原表位用以制備cTnI單克隆抗體及多克隆抗體的方法。3.一種pIII型噬菌體展示載體pFD5。4一種噬菌體展示融合表達載體pFD5-cTnI。5一種pVIII型噬菌體展示融合表達載體PC89-cTnI95～108。6.將展示有cTnI及cTnI95～108的噬菌體顆粒作免疫原，免疫新西蘭白兔獲得cTnI抗體。 |
| 國際公布 |
