| 公開(公告)號(hào) | CN1683559A |
| 公開(公告)日 | 2005.10.19 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510024103.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.02.28 |
| 專利名稱 | 精神分裂癥相關(guān)基因TTR的多態(tài)性位點(diǎn)及其應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 上海交通大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 賀林;楊異鳳;萬(wàn)春玲;馮國(guó)鄞 |
| 地址 | 200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海交達(dá)專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 毛翠瑩 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種檢測(cè)轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白TTR基因多態(tài)性位點(diǎn)的方法，其特征在于包括如下步驟：1)用常規(guī)酚氯仿方法從人的血液中提取DNA，濃度校正至10ng/μl，作為DNA模板；2)設(shè)計(jì)寡核苷酸引物序列，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增，反應(yīng)體系為15μl，其中20μM正/反向引物0.3μl，2mM脫氧核苷酸1.5μl，含20mM鎂離子的緩沖液1.5μl，DNA聚合酶0.15μl及DNA模板1.0μl和滅菌雙蒸水10.25μl，退火溫度為53度，退火時(shí)間為1分鐘，擴(kuò)增32個(gè)循環(huán)，得到TTR基因外顯子區(qū)域的DNA序列；3)對(duì)擴(kuò)增后得到的DNA序列進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序反應(yīng)總反應(yīng)體積5μl，PEABI的BigDye3.1熒光標(biāo)記的終止底物循環(huán)測(cè)序試劑混合物1μl，200ng基因組DNA，3.3pmol引物，循環(huán)參數(shù)：96℃，30s；50℃，30s；60℃，1min；循環(huán)30次，產(chǎn)物經(jīng)乙酸鈉/乙醇純化后在DNA測(cè)序儀中進(jìn)行自動(dòng)測(cè)序，找出TTR基因外顯子區(qū)域所有潛在的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種與精神分裂癥相關(guān)的基因TTR及其新發(fā)現(xiàn)的多態(tài)性位點(diǎn)，以及在檢測(cè)精神分裂癥方面的用途。本發(fā)明還提供了一種檢測(cè)TTR基因的單核苷酸多態(tài)性的方法，并用上述方法在TTR基因的SEQ ID NO：1所示序列的第293位，SEQ ID NO：2所示序列的第224位、第265位、第322位和第352位檢測(cè)到了四個(gè)新的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)和一個(gè)9核苷酸缺失的位點(diǎn)。其中，位于第二號(hào)外顯子293位的SNP1T→A的突變會(huì)造成氨基酸序列由谷氨酸到纈氨酸的改變，引起蛋白結(jié)構(gòu)和功能的變化，等位位點(diǎn)A，即在其DNA互補(bǔ)鏈上為T等位位點(diǎn)，是產(chǎn)生精神分裂癥的一個(gè)危險(xiǎn)等位位點(diǎn)，其可應(yīng)用于精神分裂癥的診斷。 |
| 國(guó)際公布 |
