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異種骨膠原基質(zhì)制備的新方法

公開(公告)號 CN1214821C  
公開(公告)日 2005.08.17  
申請(專利)號 CN03117954.1  
申請日期 2003.05.27  
專利名稱 異種骨膠原基質(zhì)制備的新方法  
主分類號 A61L27/24  
分類號 A61L27/24  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 重慶大學  
發(fā)明(設(shè)計)人 王遠亮;何創(chuàng)龍;楊立華;夏烈文  
地址 400044 重慶市沙坪壩區(qū)沙正街174號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 重慶華科專利事務(wù)所  
代理人 海燕  
國省代碼 重慶;85  
主權(quán)項 一種異種骨膠原基質(zhì)制備的新方法,其特征在于:采用一系列生物和化學方法對牛、豬等異種骨進行處理,過程如下:(1)異種骨材料的來源和加工選取新鮮的牛或豬的腿骨,經(jīng)充分去除軟組織、軟骨和骨髓后,洗凈,冷凍,切割分離干骺端,將骨骺端松質(zhì)骨加工成塊狀,其長軸與骨小梁的排列方向保持一致,骨干中部加工成圓柱體或條形;(2)脫脂處理加工好的骨塊用40~60℃壓力水反復(fù)沖洗,然后用0.01~5mol/L堿液室溫浸泡24h,將骨塊用脫脂劑于50~60℃下脫脂48~72h,每24h將骨塊取出在離心機上以4000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心30分鐘左右,清除骨塊內(nèi)細胞成分和脂肪等物質(zhì);(3)部分脫鈣處理骨塊在0.1~5mol/L酸性溶液中室溫下部分脫鈣5~10分鐘,再用雙蒸水反復(fù)透析至pH值為6,以去除殘留的酸液;(4)脫非膠原蛋白骨塊放入含有pH值為7.4的非膠原蛋白脫除劑的混合液中,該混合液的組成為含氮堿性有機物、Tris緩沖液和鹽類,置于4℃的冰箱中脫除非膠原蛋白,時間為24h;(5)蛋白酶消化骨塊用0.05~0.5%的蛋白酶消化,加入少量巰基酶抑制劑防腐,用緩沖溶液控制溶液的pH為7.8~8.0,骨液比為1∶1~1∶6,在37℃條件下消化48h,再用4mol/LNaCl浸泡12~24h,以脫除溶解的非膠原蛋白和部分膠原蛋白;(6)消毒和包裝。  
摘要 本發(fā)明涉及骨外科修復(fù)材料和骨組織工程細胞外基質(zhì)材料等生物材料技術(shù)領(lǐng)域,具體是一種異種骨膠原基質(zhì)制備的新方法。本方法選取牛、豬等異種骨,主要經(jīng)異種骨來源和加工—脫脂處理—部分脫鈣—脫非膠原蛋白—蛋白酶消化,最后消毒包裝得新型的異種骨膠原基質(zhì),該材料保留了原骨的骨礦成分和大部分膠原蛋白,其中的膠原成分經(jīng)蛋白酶消化后,切除了能夠引起免疫原性的端肽,因而免疫原性大大降低。在具有較強力學性能的同時,該材料具有較好的孔隙率和孔道連通,適合用作骨組織工程細胞外基質(zhì)材料和骨缺損移植材料,為骨移植外科和骨組織工程的發(fā)展提供廉價的生物材料。  
國際公布  
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