| 公開(公告)號 | CN1651576A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.10 |
| 申請(專利)號 | CN200410023566.2 |
| 申請日期 | 2004.02.07 |
| 專利名稱 | 一種重組雞β-防御素的生產(chǎn)方法及工藝 |
| 主分類號 | C12N15/62 |
| 分類號 | C12N15/62;C07K19/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 山東信得藥業(yè)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 趙建增;喬彥良;李朝陽;韓樹盛 |
| 地址 | 262200山東省諸城市棉織街7號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 山東;37 |
| 主權(quán)項 | 一種重組雞β-防御素的生產(chǎn)方法及工藝，主要用大腸桿菌重組雞β-防御素融合蛋白，其特征在于：用RT-PCR技術(shù)從雞上皮粘膜組織(舌頭)總RNA中擴增雞β-防御素gaIIinacin-3的編碼基因，并在基因的兩端引入適當(dāng)?shù)暮怂醿?nèi)切酶識別位點，把雞β-防御素編碼基因插入到大腸桿菌表達載體PGX-6P-1的多克隆位點，使該基因置于谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)編碼基因的下游，并形成正確的閱讀框架；于30-40°環(huán)境下，在培養(yǎng)基中加入0.1-2mMoI/LIPTG，振蕩培養(yǎng)2-10小時，誘導(dǎo)融合蛋白基因表達，在SDS-PAGE電泳中可出現(xiàn)分子量約為34Kda的一種蛋白質(zhì)：離心收集誘導(dǎo)后的重大腸桿菌，用超聲細胞破碎儀把細菌破碎，高速離心收集包涵體，并用Triton緩沖液清洗；用含尿素的裂解緩沖液溶解包含體，然后用復(fù)性緩沖液稀釋包涵體裂解液，使包涵體復(fù)性。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種重組雞β-防御素的生產(chǎn)方法及工藝：其主要目的是通過本發(fā)明獲得低成本，高藥效的抗菌藥防御素，用來降低和減少目前廣為應(yīng)用的抗生素類藥在動物肌體中形成的抗體和藥物殘留，從而保障人類的身體健康。本發(fā)明方法簡便，工藝科學(xué)，所獲得的防御素抗菌效果明顯優(yōu)于抗生素，可廣泛應(yīng)用于規(guī)�；a(chǎn)和臨床。 |
| 國際公布 |
