公開(公告)號(hào)
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CN1210306C
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公開(公告)日
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2005.07.13
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN00124831.6
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申請(qǐng)日期
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2000.09.18
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專利名稱
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平頦海蛇短鏈神經(jīng)毒素以及編碼該毒素的基因
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主分類號(hào)
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C07K14/435
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分類號(hào)
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C07K14/435;A61K38/17;A61P25/00
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中山大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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徐安龍;鐘肖芬;彭立勝;衛(wèi)劍文;吳文言;;楊文利
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地址
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510275 廣東省廣州市新港西路135號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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胡交宇
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種平頦海蛇短鏈神經(jīng)毒素基因,其選自sn12、sn36和sn160,來源于平頦海蛇(LapemisHardwickii)毒腺cDNA文庫,核苷酸序列如下,其中,″-″表示與sn160的序列相同:sn12T-GAATTCGGC-CGAGG-------------------------------------------sn36---------------------------------------------------sn160GGCTCCAGAGAAGATCACAAGATGAAAACTCTGCTGCTGACCTTGGTGGTGGTGACAATC60sn12------------------------------------------------------------sn36------------------------------------------------------------sn160GTGTGCCTGGACTTAGGATACACCATGACATGTTGCAACCAACAGTCATCGCAACCTAAA120sn12------------------------------------------------------------sn36------------------------------------------------------------sn160ACCACTACAAATTGTGCAGAGAGCTCTTGCTATAAAAAGACTTGGAGCGATCACCGTGGA180sn12---------------------------------------CCC------------------sn36---------------------------------------CAC------------------sn160ACTAGAATTGAAAGGGGATGTGGTTGCCCTCAGGTGAAGCGCGGTATTAAACTTGAATGT240sn12------------------------------------------------------------sn36------------------------------------------------------------sn160TGCCATACAAACGAATGCAACAATTAGCTCTACGAATGGCTAAATTCCTTGAGCTTTGCT300sn12-------------------------------A-------------------C--------sn36------------------------------------------------------------sn160CTCATCCATCAAGGACCATCCTTGAAAATTTGTGCTTCTGGCCTTTACCACTACATGGTC360sn12----------------------------G-------------------------------sn36------------------------------------------------------------sn160CATCATCCCCCTCTCCCCTGCTGTCTTTAACACCTCAACATCTTTCCCTTTTCTCTTGTT420sn12-----C------------------------------------------------------sn36------------------------------------------------------------sn160CTGTAAGTTTCCTTCTGCTAGTTCTGTAGTTTGAGAATCAAATAAACCTCAGCATCCAAA480sn12------------------------sn36----------------------------------------GCATCTTAGAGsn160AAAAAAAAAAAAAAAAAAATTCCTGCGGCCGCTCGAGCAT520。
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摘要
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本發(fā)明通過構(gòu)建平頦海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文庫和DNA測(cè)序,得到三個(gè)編碼短鏈神經(jīng)毒素的基因,分別稱為sn12、sn36和sn160。采用PCR方法改造并擴(kuò)增該三個(gè)cDNA,克隆到表達(dá)載體PETTRX上,以BL21-DE3為表達(dá)宿主,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),三種神經(jīng)毒素基因在大腸桿菌中都得到高效的可溶性融合表達(dá)。短鏈神經(jīng)毒素鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)表明,sn12、sn36和sn160均能明顯提高小鼠的痛閾值。
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國際公布
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