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一種人工合成的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因-rBmKCTa

公開(公告)號 CN1597951A  
公開(公告)日 2005.03.23  
申請(專利)號 CN200410012544.6  
申請日期 2004.09.22  
專利名稱 一種人工合成的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因-rBmK CTa  
主分類號 C12N15/12  
分類號 C12N15/12;C07H21/00;C12N15/11;C07K1/14;C12N15/63;C12N15/70;A61K38/16  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山西大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 梁愛華;付月君;王偉;柴寶峰;張志云  
地址 030006山西省太原市塢城路36號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 山西五維專利事務(wù)所有限公司  
代理人 楊耀田  
國省代碼 山西;14  
主權(quán)項 一種改良的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因rBmKCTa,其核苷酸序列為:ATGTGCGGTCCGTGCTTCACTACTGACGCTAACATGGCTAGAAAATGCAGAGAATGCTGTGGTGGTATCGGTAAATGCTTCGGTCCGCAGTGCCTGTGCAACCGTATCTGA  
摘要 依據(jù)大腸桿菌偏愛密碼子的原則,將天然蝎氯離子通道神經(jīng)毒素BmK CT基因進行24個位點的突變,設(shè)計了適合在大腸桿菌BL21(DE3)中表達的DNA序列,采用PCR技術(shù)完成了重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素rBmK CTa基因的人工合成。在此基礎(chǔ)上,將此基因克隆到pExSecI表達系統(tǒng)中,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)中,篩選得到高效表達的菌株,SDS-PAGE電泳檢測到該基因的表達產(chǎn)物占全菌蛋白的19.936%。經(jīng)親和層析,得到較純的具有生物學(xué)活性的蛋白,從一升培養(yǎng)液中可純化得到2.4 mg蛋白。采用本基因工程所得的改良的重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素對神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞具有抑制作用,可用于制備通過抑制神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞可以治療的疾病的藥物,也可用于蝎神經(jīng)毒素空間結(jié)構(gòu)及藥理學(xué)活性等研究。  
國際公布  
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