一種人工合成的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因-rBmKCTa
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公開(公告)號
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CN1597951A
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公開(公告)日
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2005.03.23
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申請(專利)號
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CN200410012544.6
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申請日期
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2004.09.22
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專利名稱
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一種人工合成的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因-rBmK CTa
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主分類號
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C12N15/12
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分類號
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C12N15/12;C07H21/00;C12N15/11;C07K1/14;C12N15/63;C12N15/70;A61K38/16
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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山西大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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梁愛華;付月君;王偉;柴寶峰;張志云
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地址
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030006山西省太原市塢城路36號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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山西五維專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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楊耀田
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國省代碼
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山西;14
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主權(quán)項
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一種改良的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因rBmKCTa，其核苷酸序列為：ATGTGCGGTCCGTGCTTCACTACTGACGCTAACATGGCTAGAAAATGCAGAGAATGCTGTGGTGGTATCGGTAAATGCTTCGGTCCGCAGTGCCTGTGCAACCGTATCTGA
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摘要
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依據(jù)大腸桿菌偏愛密碼子的原則，將天然蝎氯離子通道神經(jīng)毒素BmK CT基因進行24個位點的突變，設(shè)計了適合在大腸桿菌BL21(DE3)中表達的DNA序列，采用PCR技術(shù)完成了重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素rBmK CTa基因的人工合成。在此基礎(chǔ)上，將此基因克隆到pExSecI表達系統(tǒng)中，轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)中，篩選得到高效表達的菌株，SDS-PAGE電泳檢測到該基因的表達產(chǎn)物占全菌蛋白的19.936％。經(jīng)親和層析，得到較純的具有生物學(xué)活性的蛋白，從一升培養(yǎng)液中可純化得到2.4 mg蛋白。采用本基因工程所得的改良的重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素對神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞具有抑制作用，可用于制備通過抑制神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞可以治療的疾病的藥物，也可用于蝎神經(jīng)毒素空間結(jié)構(gòu)及藥理學(xué)活性等研究。
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國際公布
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