| 公開(公告)號 | CN1590560A |
| 公開(公告)日 | 2005.03.09 |
| 申請(專利)號 | CN03152882.1 |
| 申請日期 | 2003.09.01 |
| 專利名稱 | 一種從復(fù)雜組分物質(zhì)如中藥和化學(xué)混合物中高通量篩選、捕獲和分離目標(biāo)分子的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 王進(jìn)科;李同祥;陸祖宏 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王進(jìn)科;陸祖宏;李同祥 |
| 地址 | 210096江蘇省南京市四牌樓2號東南大學(xué)吳健雄實(shí)驗(yàn)室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種從復(fù)雜組分物質(zhì)高通量篩選、捕獲和分離目標(biāo)分子的新方法，包括：(a)提供雙鏈核酸微陣列芯片，該芯片上排布大量捕獲探針，其中每個探針在芯片上有區(qū)別于其它探針的具體位置，并且每個探針上都有一獨(dú)特區(qū)域；(b)將雙鏈核酸微陣列芯片與復(fù)雜組分物質(zhì)接觸；(c)篩選鑒定那些與復(fù)雜組分物質(zhì)發(fā)生相互作用的探針；(d)用所鑒定的發(fā)生相互作用的探針制備親合介質(zhì)；(e)用鑒定探針制備的親合介質(zhì)與復(fù)雜組分物質(zhì)接觸；(f)親合介質(zhì)捕獲和分離復(fù)雜組分物質(zhì)中與鑒定探針發(fā)生相互作用的目標(biāo)分子。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提出一種從復(fù)雜組分物質(zhì)如中藥和組合化學(xué)分子及其混合物中高通量篩選、捕獲和分離目標(biāo)分子的新方法。該方法首先針對特定目標(biāo)的雙鏈核酸結(jié)合蛋白特別是序列特異性DNA結(jié)合蛋白，如轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB、核受體等，在固相支持物表面制備一種雙鏈核酸微陣列芯片，使其雙鏈核酸探針上嵌合雙鏈核酸結(jié)合蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，用以高通量測定量核酸結(jié)合蛋白與雙鏈核酸微陣列芯片上各結(jié)合位點(diǎn)的親合性，建立序列核酸結(jié)合蛋白與其芯片上各核酸靶點(diǎn)的結(jié)合親合性標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)體系；再用雙鏈核酸微陣列芯片與復(fù)雜組分物質(zhì)如中藥和組合化學(xué)分子及其混合物反應(yīng)，反應(yīng)后通過檢測核酸結(jié)合蛋白與其芯片上各核酸靶點(diǎn)的結(jié)合親合性變化，篩選出那些與標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)體系比較結(jié)合親合性發(fā)生改變的核酸靶點(diǎn)；將其作為核酸親合介質(zhì)連接到層析柱表面，制備特異性核酸探針層析柱；再將復(fù)雜組分物質(zhì)如中藥和組合化學(xué)分子及其混合物灌柱，用核酸探針捕獲復(fù)雜組分物質(zhì)中與核酸探針特異結(jié)合的有效分子；最后經(jīng)洗脫收獲與核酸探針結(jié)合的有效分子，進(jìn)行其化學(xué)性質(zhì)、分子生物學(xué)基礎(chǔ)及藥理學(xué)研究，開發(fā)成為核酸結(jié)合蛋白的核酸靶點(diǎn)特異性候選藥物。該發(fā)明的技術(shù)及思想體系，在基礎(chǔ)分子生物學(xué)研究，特別是序列特異性DNA結(jié)合蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)基因表達(dá)調(diào)控，以及生物醫(yī)學(xué)研究，如序列特異性DNA結(jié)合蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)相關(guān)疾病藥物作用機(jī)理研究和藥物性分子篩選中有廣泛而重要的應(yīng)用價值。 |
| 國際公布 |
