公開(公告)號 | CN1184327C |
公開(公告)日 | 2005.01.12 |
申請(專利)號 | CN02115903.3 |
申請日期 | 2002.05.30 |
專利名稱 | 厭氧菌的一種快速檢測方法 |
主分類號 | C12Q1/04 |
分類號 | C12Q1/04;C12Q1/37 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬梨園醫(yī)院 |
發(fā)明(設計)人 | 薛存寬;王模榮;蔣鵬;王玲 |
地址 | 430077 湖北省武漢市徐東路梨園新村 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 武漢開元專利代理有限責任公司 |
代理人 | 朱盛華 |
國省代碼 | 湖北;42 |
主權(quán)項 | 厭氧菌的一種快速檢測方法,其特征在于其具體步驟為:1)標本的預處理:(1)液體標本直接加飽和氯化鈉成飽和溶液后鹽析,(2)痰、膿粘稠標本,加濃度為2~10%的鹽酸+次氯酸或酶震蕩消化數(shù)分鐘,充分溶解后,再加飽和氯化鈉鹽析,鹽酸∶次氯酸=1∶2~6,酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶,(3)組織塊固體標本,先剪碎研磨成勻漿,再加2~10%鹽酸+次氯酸或酶震蕩消化成溶液,后加飽和氯化鈉鹽析,酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶,2)標本的固相微萃取:萃取針頭采用有聚乙烯乙二醇/二乙烯苯、聚乙烯乙二醇/陰離子樹脂或聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯復合涂層的針頭,萃取方式采用密封瓶離取樣液面1公分左右頂空萃取法,萃取1分鐘以上,或液中萃取5分鐘以上,3)相色譜分析:色譜柱——彈性石英毛細管色譜柱或填充柱,固定相為聚乙二醇20M和2-硝基對苯二甲酸的反應物,簡稱FFAP,載氣——N2,檢測器——氫火焰檢測器或熱導池類檢測器,汽化室溫度——200~250℃,脫附時間——5~10以上秒,柱溫——90~150℃下恒溫,為理想分離各成分峰,或在60~220℃分二階或多階程序升溫,靈敏度——102~3mV.mL/mg,輸出衰減倍數(shù)1/1~8,4)檢測:采用定性檢測,以明確、清晰檢出以下成分峰為陽性,即有厭氧菌(1)明確、清晰檢出有異丁酸、戊酸、異戊酸峰中之一者,(2)明確、清晰檢出有乙酸、丙酸及另外一種短鏈脂肪酸峰中之一者,(3)明確、清晰檢出有二種非異丁酸、戊酸、異戊酸、乙酸、丙酸的短鏈脂肪峰者。 |
摘要 | 厭氧菌的一種快速檢測方法,涉及一種厭氧菌感染的診斷方法。其具體步驟為:標本的預處理,標本的固相微萃取(SPME),氣相色譜分析,由檢測出的厭氧菌代謝產(chǎn)生的揮發(fā)性短鏈脂肪酸成分峰,診斷出厭氧菌的存在。采用本發(fā)明,標本采集無特殊要求,標本保送無特殊條件要求及時間限制,不需培養(yǎng),可以快速檢測出患者是否感染有厭氧菌,檢測時間僅需30~40分鐘。本發(fā)明不受正常寄居菌的影響,檢測陽性率高,檢測可靠。不僅可用于厭氧菌的檢測,而且可用于病情監(jiān)測,對厭氧菌感染性疾病的診治有很高價值。 |
國際公布 |