| 公開(公告)號 | CN1563413A |
| 公開(公告)日 | 2005.01.12 |
| 申請(專利)號 | CN200410008726.6 |
| 申請日期 | 2004.03.16 |
| 專利名稱 | 用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 信學(xué)雷;李維琪;陳志慧;劉云英;麥迪娜;張云峰 |
| 地址 | 830011新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市北京南路40號附1號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 烏魯木齊中科新興專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 張莉 |
| 國省代碼 | 新疆;65 |
| 主權(quán)項 | 一種用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法，其特征在于，按下例步驟進行：a、采用常規(guī)獲得目的基因的方法，獲得載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI基因，并且將其作為藥物篩選靶標(biāo)；b、采用常規(guī)方法將載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI基因構(gòu)建酵母載體，利用酵母雙雜交系統(tǒng)，并用報告基因和酵母交配證實相互作用的存在；c、選擇酵母雙雜交系，用正常的菌株或交配的二倍體菌株檢驗具有降低血脂中膽固醇組分的毒性，只有對酵母菌株生長影響不大時才能用于檢測；d、以報告基因所表達的α、β-半乳糖苷酶定量檢測了載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI間存在相互作用強弱，定量地比較各種組分在降低血脂中膽固醇能力的差別；e、本方法不僅用于篩選化合物單體，同時也用于復(fù)方的篩選。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法，該方法首先從大鼠肝臟總RNA用RT-PCR方法獲得了wistar大鼠的載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)基因的全長cDNA，并將其克隆入酵母表達載體，利用報告基因、省卻培養(yǎng)基、酵母交配證實了在載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)間存在相互作用，以報告基因所表達的α、β-半乳糖苷酶定量檢測了載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)間存在相互作用強弱，并運用在動物實驗中證明有效的藥物為陽性對照，檢驗了該方法，證明該方法有效，可用于在基因水平上篩選和評價具有調(diào)脂效果的關(guān)鍵組分。該方法成本低廉，高效準(zhǔn)確，又可部分揭示了藥物降低膽固醇的作用機理。 |
| 國際公布 |
