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人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法

公開(公告)號 CN1171991C  
公開(公告)日 2004.10.20  
申請(專利)號 CN02134313.6  
申請日期 2002.07.08  
專利名稱 人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法  
主分類號 C12N5/00  
分類號 C12N5/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 徐如祥;曉丹  
發(fā)明(設(shè)計)人 徐如祥;姜曉丹  
地址 510282 廣東省廣州市工業(yè)大道253號珠江醫(yī)院神經(jīng)外科  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 廣州知友專利代理有限公司  
代理人 宣國華  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法,其特征在于由以下步驟組成:(1)配制人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的配制步驟為:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,加純凈水至濃度為10~25g/L,并充分?jǐn)嚢枞芙,制得?xì)胞的一般基礎(chǔ)培養(yǎng)液;b、再取胰島素、L-谷酰胺、鹽酸丁二胺、硒化鈉、人轉(zhuǎn)蛋白、氫化可的松、黃體酮依次加入基礎(chǔ)培養(yǎng)液中,充分?jǐn)嚢杈鶆;c、以1~10當(dāng)量濃度的氫化鈉調(diào)pH為7.4~8.0;d、層流細(xì)胞培養(yǎng)室抽濾消毒,4℃儲存?zhèn)溆茫?2)取步驟1配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,取新鮮血清加入培養(yǎng)基中,血清的含量為培養(yǎng)基的5~20%;將加入血清的培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育11~21天。  
摘要 本發(fā)明公開了一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胰島素、鹽酸丁二胺、硒化鈉、氫化可的松、L-谷氨酰胺、人轉(zhuǎn)鐵蛋白和黃體酮組成的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基;2、即時采集病員本人自體血清;3、將采集的病員本人自體血清加入配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育。本發(fā)明方法簡單,可重復(fù)性強(qiáng),操作簡便易行;為有關(guān)神經(jīng)干細(xì)胞及其應(yīng)用的科研、教學(xué)、臨床應(yīng)用等能起到不可估量的作用,同時也孕育著巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。  
國際公布  
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