| 公開(公告)號 | CN1536088A |
| 公開(公告)日 | 2004.10.13 |
| 申請(專利)號 | CN03116325.4 |
| 申請日期 | 2003.04.11 |
| 專利名稱 | 一種多重引物的PCR方法及其反應(yīng)液和在制備檢測試劑中的應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12P19/34 |
| 分類號 | C12P19/34;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 徐定邦;徐文慧 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 徐定邦;朱德芬;陳有容;徐文慧 |
| 地址 | 200071上海市永興路58弄2號603室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種多重引物的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，由2對以上引物同時(shí)針對模板DNA鏈進(jìn)行如下反應(yīng)：(1)模板變性；(2)引物退火；(3)DNA聚合酶催化下延伸合成互補(bǔ)DNA鏈；(4)按步驟(1)-(3)循環(huán)進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)；其特征在于，模板變性溫度在前2或3個循環(huán)為92-97℃，在后續(xù)的循環(huán)中為65-87℃。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種多重引物的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法及其反應(yīng)液和在制備微生物檢測試劑中的應(yīng)用，特別涉及在PCR過程中采用92-97℃和65-87℃兩種變性溫度分別進(jìn)行最初2或3個循環(huán)和其他后續(xù)循環(huán)，克服了現(xiàn)有的針對同一DNA鏈的多重PCR中正反引物間相互非專一性配對擴(kuò)增，形成非特異產(chǎn)物的缺陷。通過合適的產(chǎn)物設(shè)計(jì)和兩種變性溫度的設(shè)置，顯著降低了PCR前期合成的非目標(biāo)產(chǎn)物參與后續(xù)循環(huán)的可能性，適用于制備單管式多重PCR快速檢測試劑，在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、人乳頭瘤病毒等病毒各種變異株、血清型、基因型或其亞型檢測和結(jié)核桿菌等細(xì)菌耐藥基因檢測等方面有良好的應(yīng)用前景。 |
| 國際公布 |
