| 公開(公告)號 | CN1162547C |
| 公開(公告)日 | 2004.08.18 |
| 申請(專利)號 | CN02135393.X |
| 申請日期 | 2002.08.30 |
| 專利名稱 | 靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與用途 |
| 主分類號 | C12N15/86 |
| 分類號 | C12N15/86;C12N15/11;C12N7/01;C12Q1/68;A61K39/29;A61K48/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 山東大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 孫汶生;馬春紅;張利寧;曹英林;劉素俠 |
| 地址 | 250100 山東省濟(jì)南市山大南路27號 |
| 頒證日 | 2004.08.18 |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 濟(jì)南三達(dá)專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 孫君 |
| 國省代碼 | 山東;37 |
| 主權(quán)項 | 靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體，其特征在于是以EB病毒表達(dá)質(zhì)粒pEBAF為載體，由AFP啟動子控制的、僅特異性表達(dá)于AFP陽性的肝癌組織表達(dá)載體，構(gòu)建的三種HBV反義RNA表達(dá)載體pEBAF-as-preS2、pEBAF-as-preS1、pEBAF-as-X分別含有HBV preS2(3203-340)、preS1(2301-2925)和X(1370-1873)區(qū)段基因。 |
| 摘要 | 靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與用途，屬于乙肝病毒相關(guān)肝細(xì)胞肝癌的基因治療物。本發(fā)明是以EB病毒表達(dá)質(zhì)粒pEBAF為載體，由AFP啟動子控制的、僅特異性表達(dá)于AFP陽性的肝癌組織表達(dá)載體，構(gòu)建的三種HBV反義RNA表達(dá)載體pEBAF-as-preS2、pEBAF-as-preS1、pEBAF-as-X分別含有HBV preS2、preS1和X區(qū)段基因。反義RNA表達(dá)載體的制備方法，包括：擴(kuò)增目的基因、設(shè)計引物，PCR擴(kuò)增HBpreS2、HBpreS1、HBX基因，體外重組，包括目的基因與質(zhì)粒DNA的酶切、純化及連接、轉(zhuǎn)化，含目的基因陽性重組子的篩選、鑒定，包括重組子質(zhì)粒DNA的抽提、雙輪PCR篩選及測序鑒定。本發(fā)明的反義RNA表達(dá)載體用于乙肝病毒相關(guān)肝細(xì)胞肝癌及慢性乙肝病毒感染的治療物質(zhì)。 |
| 國際公布 |
