| 公開(公告)號 | CN1518599A |
| 公開(公告)日 | 2004.08.04 |
| 申請(專利)號 | CN02812556.8 |
| 申請日期 | 2002.06.19 |
| 專利名稱 | 新方法 |
| 主分類號 | C12N15/68 |
| 分類號 | C12N15/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2001.6.21 SE 0102204－5 |
| 申請(專利權(quán))人 | 利夫·艾薩克森;彼得·J·黑格 |
| 發(fā)明(設計)人 | 利夫·艾薩克森;彼得·J·黑格;;法黑德·M·阿布達爾卡里姆 |
| 地址 | 瑞典烏普薩拉 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/EP2002/006780 2002.6.19 |
| 進入國家日期 | 2003.12.22 |
| 專利代理機構(gòu) | 北京市柳沈律師事務所 |
| 代理人 | 巫肖南;封新琴 |
| 國省代碼 | 瑞典;SE |
| 主權(quán)項 | 用于去除抗生素耐藥性和/或使質(zhì)粒穩(wěn)定的方法，包括如下步驟：a)構(gòu)建含有為同向重復序列基因所包圍的抗生素耐藥性基因的載體，其中所述同向重復序列基因可以是必需基因，b)還可以在該載體中插入所述必需基因，適宜于該必需基因的啟動子及一個多克隆位點，c)用a)或b)所得載體轉(zhuǎn)染宿主細胞，d)去除宿主細胞中的染色體必需基因，e)體內(nèi)去除抗生素耐藥性基因，其中，步驟a)和b)可以用相反的順序完成。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及用于除去抗生素耐藥性和/或使質(zhì)粒穩(wěn)定的方法。本發(fā)明包括構(gòu)建載體的步驟，所述載體含有為同向重復序列基因所包圍的抗生素耐藥性基因。此同向重復序列基因可以是一個必需基因或Rek-序列。在后一種情況中，載體中存在具有適宜啟動子的必需基因。用所得的載體轉(zhuǎn)化宿主細胞，之后去除宿主細胞中必需的染色體基因并去除細胞中載體內(nèi)的抗生素耐藥性基因。優(yōu)選的必需基因是infA。本發(fā)明也涉及在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定維持載體的方法，在細胞中生產(chǎn)DNA的方法和在細胞中生產(chǎn)氨基酸，肽和蛋白的方法。而且，本發(fā)明還涉及已去除染色體必需基因，并含有下述載體的轉(zhuǎn)化宿主細胞，該載體含有相應的必需基因，還可能含有一或多個所需的基因X。該載體不攜帶抗生素耐藥性基因。本發(fā)明還包括從宿主獲得的載體DNA在制備用于基因治療的藥物組合物，如疫苗中的用途。攜帶含有適宜基因X的載體的細菌可被用于大規(guī)模生產(chǎn)該基因的基因產(chǎn)物所針對的化合物。 |
| 國際公布 | WO2003/000881 英 2003.1.3 |
