| 公開(公告)號 | CN1511592A |
| 公開(公告)日 | 2004.07.14 |
| 申請(專利)號 | CN02159528.3 |
| 申請日期 | 2002.12.30 |
| 專利名稱 | 一種含有表皮生長因子的皮膚組織工程支架的構(gòu)建方法 |
| 主分類號 | A61L27/60 |
| 分類號 | A61L27/60;A61F13/02;A61F2/02 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國皮革和制鞋工業(yè)研究院;中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 楊穎颙;于淑賢;劉杰;王德文 |
| 地址 | 100016北京市朝陽區(qū)將臺西路18號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京科興園專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 王蘊(yùn);屈獻(xiàn)莊 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種含有表皮生長因子的皮膚組織工程支架的構(gòu)建方法，其特征在于它按下述步驟進(jìn)行：(a)、以胎牛皮或牛跟腱為基料，按常規(guī)方法進(jìn)行脫毛、去筋膜及脂肪和污血、清洗、冷凍、切薄片，用丙酮脫水，再用石油醚脫脂，制成脫水脫脂的胎牛皮或牛跟腱為原料，用雙蒸水清洗原料后加入反應(yīng)器內(nèi)，加入原料重量1～5％的胃酶或無花果酶或木瓜酶或胰凝乳蛋白酶或菠蘿酶，與原料重量10倍的水配制的水溶液進(jìn)行一次酶處理，在20～40℃、pH＝2～8條件下、機(jī)械振動8～12小時，降解組織纖維間的共價鍵，經(jīng)離心分離，棄上清液取沉淀用雙蒸餾水洗滌三次以上，加入原料重量的50～150倍的0.5M醋酸溶液，在0～20℃溫度下，振動24～32小時，再加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉濃度達(dá)到2M，沉淀完全后，經(jīng)離心分離，棄上清液取沉淀裝入透析袋進(jìn)行透析3～4次，收集透析后膠原溶液，加入反應(yīng)器內(nèi)，并加入上述原料重量1～3％的無花果酶或木瓜酶或胰凝乳蛋白酶或菠蘿酶，與原料重量10倍的配制的水溶液進(jìn)行二次酶處理，在30～40℃、pH＝2～8條件下、機(jī)械振動4～8小時，去除抗原決定簇；再按常規(guī)方法酶滅活處理，經(jīng)離心分離，棄上清液用原料重量50～150倍的0.05～0.5M的醋酸水溶液溶解，得到酸溶性0.5～4mg/ml的無抗原性膠原溶液；(b)、再將(a)項的無抗原性膠原溶液倒入預(yù)冷模型中，在-10～-70℃溫度下冷凍4～24小時，再真空冷凍干燥24～48小時，得到孔徑均勻，厚度為0.1～0.5mm的膠原海綿膜，然后置入0.5～10％濃度的丙三醇水溶液中，丙三醇水溶液用量為膠原海綿膜重量50～150倍，吸附膨脹后取出膠原海綿膜，在105～130℃溫度下，真空干燥18～32小時，得到干膠原海綿膜；(c)、將肝素溶于0.005～1M的醋酸水溶液中，水溶液肝素含量為0.1～10mg/ml，然后用100目濾網(wǎng)過濾，得到肝素醋酸水溶液；(d)、將表皮生長因子溶于三蒸水中，三蒸水中表皮生長因子的含量為0.001～0.1μg/ml，得到表皮生長因子水溶液；(e)、最后將(c)項的肝素醋酸水溶液和(d)項的表皮生長因子水溶液按體積比1∶1～50的比例混合，機(jī)械振動48小時后，將上述混合液再與5％的丙三醇水溶液按體積比0.1～5∶100混合后，浸潤(b)項的干膠原海綿膜，潤濕后，在-10～-70℃溫度下，冷凍4～10小時，再真空干燥，得到的構(gòu)建含有表皮生長因子的皮膚組織工程支架。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種含有表皮生長因子的皮膚組織工程支架的構(gòu)建方法，其特征是它以胎牛皮或牛跟腱為基料，經(jīng)過脫水、脫脂處理，進(jìn)行一次酶處理，降低組織纖維間的共價鍵，再經(jīng)透析，進(jìn)行二次處理，除去抗原決定簇，再用醋酸溶解得到無抗原性膠原溶液，再制成膠原海綿膜，用丙三醇浸泡吸附，經(jīng)干燥后將肝素醋酸水溶液與表皮生長因子水溶液的混合物與丙三醇再次混合潤濕膠原海綿膜，經(jīng)冷凍干燥構(gòu)建成皮膚組織工程支架。該支架具有無抗原性、強(qiáng)度高、柔韌性好、手術(shù)植入方便、對創(chuàng)傷面無毒害、并可有效誘導(dǎo)創(chuàng)傷面部位自體細(xì)胞生長、促進(jìn)創(chuàng)面愈合的優(yōu)點(diǎn)及效果。 |
| 國際公布 |
