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禽腺病毒復(fù)制非必須片段的篩選及其基因工程產(chǎn)品

公開(公告)號 CN1462804A  
公開(公告)日 2003.12.24  
申請(專利)號 CN03131899.1  
申請日期 2003.06.13  
專利名稱 禽腺病毒復(fù)制非必須片段的篩選及其基因工程產(chǎn)品  
主分類號 C12Q1/68  
分類號 C12Q1/68;C12P19/34;C12N7/01;C12N15/861;A61K48/00;A61K39/235;A61P31/12  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 揚州大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 秦愛建;何秀苗;劉岳龍;金文杰  
地址 225009江蘇省揚州市大學(xué)南路88號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 揚州市錦江專利事務(wù)所  
代理人 江平  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 禽腺病毒復(fù)制非必須片段的篩選,其特征在于主要由以下步驟完成:1)以中國雞群分離的I群禽腺病毒為材料,通過PCR方法將病毒基因組的兩個末端L片段和r片段、ITR片段擴(kuò)增出來,克隆進(jìn)載體,并以報告基因插入設(shè)計好的r片段和ITR片段之間,構(gòu)建轉(zhuǎn)移質(zhì)粒載體;2)將構(gòu)建的禽腺病毒轉(zhuǎn)移質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染已被野生病毒感染了的雞胚腎細(xì)胞,進(jìn)行同源重組,篩選重組病毒。  
摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)制藥工業(yè)中的基因工程生產(chǎn)疫苗藥物的技術(shù)領(lǐng)域。以中國分離的I群禽腺病毒為材料,通過PCR方法將該病毒基因組的兩個末端L片段和r片段、ITR片段擴(kuò)增出來,克隆進(jìn)pHC粘粒載體中,并以增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(eGFP)基因為報告基因,插入設(shè)計好的r片段和ITR片段之間,構(gòu)建轉(zhuǎn)移質(zhì)粒載體pFAV-eGFP,然后轉(zhuǎn)染已被野生病毒感染了的雞胚腎細(xì)胞,進(jìn)行同源重組,篩選重組病毒,獲得表達(dá)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的重組禽腺病毒。從而確定位于基因組右末端r片段和ITR片段之間的位點為病毒復(fù)制非必需區(qū),并以此為載體開發(fā)研制相關(guān)基因工程產(chǎn)品。  
國際公布  
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