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重組人α1-胸腺肽生產(chǎn)方法及制劑

公開(公告)號 CN1990862A  
公開(公告)日 2007.07.04  
申請(專利)號 CN200510112134.3  
申請日期 2005.12.28  
專利名稱 重組人α1-胸腺肽生產(chǎn)方法及制劑  
主分類號 C12N15/09(2006.01)I  
分類號 C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61K9/19(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 上海華新生物高技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 常志遠(yuǎn);楊 忠;王 偉  
地址 201206上海市浦東新區(qū)桂橋路1150號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 上海伯瑞杰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 吳澤群  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項 一種人α1-胸腺肽的生產(chǎn)方法,該方法依次包括如下步驟: (1)人α1-胸腺肽基因工程菌的構(gòu)建:α1-胸腺肽基因通過化學(xué)方法合成或者通過PCR法從人cDNA文庫中擴增得到,其合成基因包含SD序列—純化標(biāo)簽—蛋白酶切位點或化學(xué)裂解點—人α1-胸腺肽基因—終止的堿基序列,然后通過內(nèi)切酶酶切,將人α1-胸腺肽基因克隆至表達(dá)載體中,表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主菌得到基因工程菌; (2)將構(gòu)建完成的基因工程菌進行液體培養(yǎng)和發(fā)酵,通過IPTG誘導(dǎo)或溫度誘導(dǎo),表達(dá)大量的可溶性的重組人α1-胸腺肽;所述液體培養(yǎng)和發(fā)酵所使用的培養(yǎng)基為LB培養(yǎng)基及M9培養(yǎng)基中的一種或二者的混合物,二者的配比為:LB∶M9=1∶0.1-1∶10; (3)重組人α1-胸腺肽的純化:發(fā)酵生產(chǎn)的重組人α1-胸腺肽經(jīng)過菌體破碎、離心、濃縮、層析手段得到融合蛋白,通過蛋白酶切、化學(xué)裂解方式,結(jié)合親和層析及脫鹽得到較高純度的重組人α1-胸腺肽多肽。  
摘要 本發(fā)明公開了生產(chǎn)人α1-胸腺肽的方法及由該方法生產(chǎn)的人α1-胸腺肽制劑,該方法包括:人α1-胸腺肽基因工程菌的構(gòu)建、基因工程菌的液體培養(yǎng)和發(fā)酵,重組人α1-胸腺肽的純化等步驟。本發(fā)明所述的入α1-胸腺肽生產(chǎn)方法具有可保證產(chǎn)品質(zhì)量一致性,不受原料來源限制,且成本較低,可以大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點,所生產(chǎn)的產(chǎn)品可以作為注射制劑,用于免疫功能低下等疾病的預(yù)防、治療和輔助治療。  
國際公布  
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