公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN100345971C
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公開(kāi)(公告)日
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2007.10.31
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03141577.6
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申請(qǐng)日期
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2003.07.14
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專利名稱
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重組人干細(xì)胞因子的原核表達(dá)載體、工程菌及制備方法
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主分類號(hào)
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C12N15/70(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/715(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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第二軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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陳國(guó)友;蔣應(yīng)明;黃 欣;張 意;盧 琳;施群英;曹雪濤
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地址
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200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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徐 迅
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種用于重組表達(dá)人干細(xì)胞因子的原核表達(dá)載體,其特征在于,所述的載體含有人干細(xì)胞因子表達(dá)盒以及與所述表達(dá)盒操作性相連的啟動(dòng)子,所述的表達(dá)盒從5’至3’依次具有:序列為TTAACTTTA的增強(qiáng)子、長(zhǎng)度為14±2bp的上游間隔序列、和人干細(xì)胞因子的編碼序列、終止密碼子; 其中所述的上游間隔序列具有SEQIDNO:7中第10-23位的序列。
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摘要
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本發(fā)明涉及高效表達(dá)重組人干細(xì)胞因子(rhSCF)的表達(dá)載體、工程菌及制備方法。本發(fā)明還提供了通過(guò)優(yōu)選的培養(yǎng)基成分及優(yōu)化發(fā)酵參數(shù),建立了工程菌高密度發(fā)酵方法。還提供了通過(guò)包涵體變性、蛋白復(fù)性、色譜分離制備高純度重組人干細(xì)胞因子的方法。本發(fā)明中構(gòu)建的重組人干細(xì)胞因子表達(dá)工程菌具有表達(dá)量高,表達(dá)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),所采取的純化工藝穩(wěn)定可靠,得率高,利于大規(guī)模生產(chǎn)。
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國(guó)際公布
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