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抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法

公開(公告)號 CN101139568A  
公開(公告)日 2008.03.12  
申請(專利)號 CN200710035499.X  
申請日期 2007.08.03  
專利名稱 抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法  
主分類號 C12N1/21(2006.01)I  
分類號 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 湖南師范大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 夏立秋;鄒先瓊;丁學(xué)知;張友明;孫運(yùn)軍;黃 璠;莫湘濤  
地址 410081湖南省長沙市岳麓區(qū)麓山路36號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 長沙星耀專利事務(wù)所  
代理人 寧星耀;寧 岡  
國省代碼 湖南;43  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)采用大腸桿菌的偏愛密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化; (2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2; (3)選用PCR對表達(dá)載體進(jìn)行改造,構(gòu)建載體pETΔt: (4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體,構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2; (5)構(gòu)建多順反子表達(dá)載體pETΔt21,以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2; (6)將所述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B,構(gòu)建抗癌抗菌工程菌,實(shí)現(xiàn)抗菌肽的異源表達(dá); (7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。  
摘要 本發(fā)明公開了一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法,其包括以下步驟:(1)采用大腸桿菌的偏愛密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化;(2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2;(3)選用PCR對表達(dá)載體進(jìn)行改造,構(gòu)建載體pETΔt:(4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體,構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2;(5)構(gòu)建多順反子表達(dá)載體pETΔt21,以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2;(6)將所述述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B;(7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。本發(fā)明工藝簡單,生產(chǎn)成本低,所得產(chǎn)品抗癌抑菌活性高。  
國際公布  
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