魚病診斷技術(shù)
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魚病防治技術(shù)是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的重要組成部分,魚病診斷技術(shù)又是魚病防治的基礎(chǔ),近年來國內(nèi)隨著魚病防治工作的加強(qiáng),人類醫(yī)學(xué)上和動(dòng)物醫(yī)學(xué)上的一些技術(shù)用于魚病的診斷。魚病診斷技術(shù)正在向健康、快速、準(zhǔn)確的方向發(fā)展。目前主要有以下幾種診斷技術(shù)。 1、熒光抗體技術(shù)(FAT、免疫熒光技術(shù)):是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。以熒光色素標(biāo)記病魚的抗原或抗體,與其相應(yīng)的抗原或抗體相結(jié)合,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性的熒光反應(yīng)。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng),敏感性高,檢出速度快。缺點(diǎn)是:非特異性染色尚未完成解決,結(jié)果判斷的客觀性不足,技術(shù)程序比較復(fù)雜! 2、免疫酶技術(shù)(EAT):是根據(jù)抗原和抗體特異性結(jié)合,以酶作為標(biāo)記物,酶對病魚底物具有高效催化作用的原理建立的(病魚底物包括組織細(xì)胞中的抗原或抗體成分、體液中可溶性抗原或抗體成分)。酶標(biāo)抗體或抗原與其相對應(yīng)的抗原或抗體相結(jié)合后,形成酶標(biāo)抗體-抗原復(fù)合物。復(fù)合物酶遇到相當(dāng)應(yīng)的底物時(shí),底物被氧化分解,生成有色物質(zhì)?捎蔑@微鏡或光電比色定性、定量檢測相對應(yīng)抗原或抗體。此法靈敏度高,標(biāo)本易久存! 3、中和試驗(yàn)技術(shù):是測定魚類的抗體或抗原中和抗原或抗體的能力。主要用于病毒鑒定和病毒性抗體的測定及查獲無征象的帶病魚。 4、對流免疫電泳技術(shù):是一種瓊脂擴(kuò)散與電泳原理,用以分析魚類免疫血清或抗原組分的有效方法,可在30—90分鐘內(nèi)檢出抗體! 5、反向間接血球凝集反應(yīng)技術(shù):是當(dāng)顆粒性(如細(xì)菌)和相應(yīng)抗體結(jié)合后,在電解質(zhì)存在的條件下出現(xiàn)凝集反應(yīng)?捎媚磻(yīng)測定病魚中抗體效價(jià)! 6、核酸探針技術(shù):其原理為堿基配對,互補(bǔ)的兩條核酸鏈通過退火形成雙鏈,這一過程稱為核酸雜交。核酸探針是帶有標(biāo)記物的已知序列的核酸片斷,它能和與其互補(bǔ)的核酸序列雜交,形成雙鏈,所以可用于待測核酸樣品中特定基因序列的檢測。不同微生物其形態(tài)和體內(nèi)物質(zhì)成分不同,其基因也不同,通過分離和標(biāo)記這些基因片斷就可制成探針,用雜交的方法可以進(jìn)行魚類病原菌的鑒定! 7、單克隆抗體技術(shù):主要用于病原診斷、病理診斷,隨著微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、免疫學(xué)的研究進(jìn)展,人類對感染性和寄生蟲性疾病有了新的認(rèn)識(shí),一個(gè)病原體存在著許多性質(zhì)不同的抗原上,采用雜交瘤技術(shù),可以獲得識(shí)別不同抗原,從而可以對感染性疾病和寄生蟲病進(jìn)行快速準(zhǔn)確的診斷。。魚體內(nèi)殘留的藥物,受污染的情況,也可以利用抗生素或抗藥的單克隆做定性或定量分析。
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