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豬病免費(fèi)問答:豬衣原體病的確診方法有哪些?

豬衣原體病的確診方法有哪些?

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可根據(jù)該病的流行病學(xué)、臨床特點(diǎn)和病理變化等可做出初步診斷,確診需做實(shí)驗(yàn)室檢查。(一)細(xì)菌學(xué)診斷無菌采取死豬的肝、脾、肺、排泄物、病損關(guān)節(jié)液、流產(chǎn)胎豬及胎盤等病料,磨碎加緩沖生理鹽水稀釋成20%懸液,在每毫升懸液中加1mL鏈霉素或1mg卡那霉素殺死雜菌,經(jīng)1000r/min離心沉淀10min,取上清液重復(fù)離心兩次,最后取上清液0.5mL接種在5-7日齡雞胚的卵黃囊內(nèi),雞胚常在接種后3-10d死亡。也可用0.2mL接種于3-4周齡的小白鼠腹腔內(nèi),如果病料中含有衣原體,往往引起小鼠發(fā)生腹膜炎,腹腔中積聚大量纖維素性滲出物,以致接種鼠出現(xiàn)腹腔顯著膨大,脾臟腫大等特征性病變。也可經(jīng)鼻內(nèi)、腦內(nèi)接種,接種后1-3周死亡,部分活仔鼠也常在2 - 3d內(nèi)發(fā)病,出現(xiàn)呼吸器官、中樞神經(jīng)系統(tǒng)病損及卡他性化膿性角膜結(jié)膜炎。感染動(dòng)物的腹腔滲出液涂片中,可發(fā)現(xiàn)衣原體包涵體。采集病料后,也可涂片以Cimenez, Stamp和Giemsa方法染色,能見到肝、脾、肺上有稀疏的衣原體。膀胱和胎盤涂片有時(shí)可見到大量衣原體及包涵體。(二)血清學(xué)診斷血清學(xué)試驗(yàn)有補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)(CF)、血凝抑制( HI)試驗(yàn)、團(tuán)集補(bǔ)體吸收(CCA)試驗(yàn)、毛細(xì)血管凝集(CTA)試驗(yàn)、瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)(AGP)、間接血凝試驗(yàn)(INA)、免疫熒光及免疫酶試驗(yàn)等。CF是國內(nèi)使用的經(jīng)典方法,一般用處理過的衣原體屬特異性抗原測定被檢血清。該法特異性較好,但靈敏度不夠高,豬衣原體病診斷不太適宜用本法。雖發(fā)展了間接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),但因操作繁瑣影響了使用。HI、CCA、CTA方法較簡單、敏感,但可靠性和有效性需進(jìn)一步驗(yàn)證。血清濃度高時(shí),易發(fā)生非特異性凝集。ACP靈敏度有時(shí)不及CF試驗(yàn)。IHA診斷抗原效價(jià)下降較快,有時(shí)出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。免疫熒光和免疫酶試驗(yàn)屬現(xiàn)代標(biāo)記抗體技術(shù),如標(biāo)記抗體的質(zhì)量很高,可大大提高檢測衣原體抗原或抗體的靈敏度和特異性。近年來,免疫酶聯(lián)染色法、Dot -ELISA、衣原體單克隆抗體、核酸雜交與核酸探針技術(shù)等在衣原體方面的應(yīng)用開始起步。
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