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豬病免費(fèi)問(wèn)答:如何通過(guò)血清學(xué)診斷豬炭疽病?

如何通過(guò)血清學(xué)診斷豬炭疽病?
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血清學(xué)診斷 炭疽沉淀反應(yīng)(Ascoli氏反應(yīng)):當(dāng)病料已經(jīng)腐敗用細(xì)菌學(xué)診斷得不到可靠結(jié)果,以及檢查大量畜產(chǎn)品時(shí),可用炭疽沉淀反應(yīng)。采取病料以肝、脾、腎以及血液為適宜。將被檢血液或臟器研磨后,用生理鹽水稀釋5-10倍,煮沸15-20min,取浸出液用中性石棉濾過(guò),用毛細(xì)管吸取透明濾液,徐徐重積于小試管內(nèi)的沉淀素血清上,于1-5min內(nèi)如接觸面出現(xiàn)清晰的白色沉淀環(huán)(白輪),為陽(yáng)性。莢膜腫脹試驗(yàn):有莢膜的炭疽桿菌與抗炭疽莢膜血清結(jié)合產(chǎn)生抗原一抗體反應(yīng),在莢膜表面發(fā)生輕微的沉淀反應(yīng),使莢膜增厚,鏡檢時(shí),在炭疽桿菌的周圍可以看到折光性強(qiáng)的莢膜。涂有適當(dāng)稀釋(每個(gè)視野約10個(gè)菌的濃度)的純培養(yǎng)物的載玻片或感染7- 8h處死的小鼠腹腔液涂片,滴加一滴抗炭疽莢膜血清,混勻,制成濕片,鏡下觀察,如有大桿菌周圍可見邊緣清晰、肥厚不等的莢膜,即為陽(yáng)性。也可用熒光抗體莢膜染色法,方法是將病料涂片,干燥,固定后用炭疽莢膜血清(即用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的提純的抗炭疽莢膜血清抗體)染色后,用熒光顯微鏡觀察,則炭疽菌的菌體高度膨大,莢膜呈明亮黃綠色熒光。但應(yīng)注意類屬反應(yīng)問(wèn)題。對(duì)炭疽芽孢可用炭凝集試驗(yàn),乳膠凝集試驗(yàn)進(jìn)行診斷,數(shù)分鐘之內(nèi)即可得出結(jié)果。 炭凝集試驗(yàn):玻璃板上滴加被檢標(biāo)本O.lmL(用0.2%氯化鈉溶液稀釋),然后加入炭疽炭粉血清0.05mL,混勻,靜置1-5min,凡出現(xiàn)“++”以上凝集者,即使炭粉一半凝集,且液體較透明者為陽(yáng)性,該反應(yīng)可檢出每毫升約含78000個(gè)以上的炭疽桿菌芽孢標(biāo)本。乳膠凝集試驗(yàn):同一玻板上,分別滴加被檢材料2滴,每滴O.lmL,另一側(cè)分別滴加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原2滴,每滴也為O.lmL,然后再分別往被檢材料滴及炭疽標(biāo)準(zhǔn)抗原滴中滴加炭疽乳膠血清及正常乳膠血清各0.05mL,分別混勻,室溫下靜置,5min內(nèi)判定結(jié)果。當(dāng)三個(gè)對(duì)照滴:炭疽乳膠血清加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原呈“++++",正常乳膠血清加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原呈“一”,正常乳膠血清加被檢標(biāo)本呈“一”,出現(xiàn)上述結(jié)果,說(shuō)明反應(yīng)條件正常,這時(shí)炭疽乳膠血清與被檢標(biāo)本滴發(fā)生反應(yīng)者為陽(yáng)性,不發(fā)生反應(yīng)者為陰性。除以上所介紹的方法外,協(xié)同凝集反應(yīng),酶聯(lián)植物凝集素吸附試驗(yàn),瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng),酶標(biāo)葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)間接染色法等也逐步被應(yīng)用于炭疽的診斷。
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