LDL受體相關(guān)蛋白質(zhì)(LDL receptor related protein ,LRP)是Herz等于1988年發(fā)現(xiàn),其組成及結(jié)構(gòu)與LDL受體類同,可能屬于殘粒受體(remnant receptor)的一種。其后證明,LRP又是α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2MG)受體。根據(jù)LRP的cDNA分析,他含有與LDL受體相同重復(fù)序列,而且與LDL受體重復(fù)序列互補(bǔ)的寡核苷酸可與LRP交叉雜交,所以稱為LDL受體相關(guān)蛋白。LRP組成及結(jié)構(gòu)見圖7-4所示。
利用寡核苷酸篩查法,已得到LRp cDNA并已闡明LRP氨基酸排列順序,如圖7-6所示。LRP由4526個(gè)氨基酸殘基組成,是一種大分子量的糖蛋白,分布于大多數(shù)細(xì)胞內(nèi)膜。
LRP與LDL受體,二者的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)極為相似,并與補(bǔ)體C8/C9結(jié)構(gòu)組成具有高度類同性。
圖7-4 LRP的結(jié)構(gòu)與LDL受體結(jié)構(gòu)比較
圖7-5 LDL受體蛋白(LRP)的結(jié)構(gòu)與代謝
圖7-6 LRP的氨基酸序列
(引自HerzJ.1988)
細(xì)胞膜外存在的ECG前體結(jié)構(gòu)域,LRP與LDL受體也類同,其中細(xì)胞外部的結(jié)構(gòu)同樣以三種形式存在:①20個(gè)氨基酸中有6個(gè)半胱氨酸殘基,這種A基元(Amotif)帶負(fù)電荷,該結(jié)構(gòu)與脂蛋白結(jié)合有關(guān);②EGF前體結(jié)構(gòu)域的B基元的40個(gè)氨基酸中也有6個(gè)半胱氨酸存在,起有間隔基元的作用;③EGF前體結(jié)構(gòu)域的另50個(gè)氨基酸序列中有Tyr-Trp-Thr-Asp結(jié)構(gòu),即YWTD重復(fù)序列。這一系列的相同性可能與這兩種基因結(jié)構(gòu)類似性有關(guān)。
LRP有兩個(gè)疏水性很強(qiáng)的結(jié)構(gòu)存在,其一是N端19個(gè)氨基酸的信號肽;其二是C端側(cè)的組抽酸殘基?缒そY(jié)構(gòu)域N端存在多個(gè)半胱氨酸,在細(xì)胞膜外側(cè)以-S-S-鍵連接。LRP比LDL受體大兩倍。LDL受體的有被小窩(coated pit)的第807位為酪氨酸,其周圍的氨基酸組成與LRP高度相似。經(jīng)有被小窩包吞作用(endocytosis)攝取細(xì)胞外物質(zhì)的過程,LRP與其完全相同。在LDL受體胞液結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中天冬酰胺-脯氨酸-X-酪氨酸(NPXY)重復(fù)序列存在,在LRP結(jié)構(gòu)中也存在。
LRP在細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成,分子量為600kD(SDS-PAGE檢測),在高爾基氏體內(nèi)分解成515kD和85kD兩種分子形式,分別稱為α、β亞基,二者以非共價(jià)鍵結(jié)合。515kD的α亞基以貫通形式存在于細(xì)胞膜上,85kD的β亞基存在于膜內(nèi)(見圖7-5)。
直到目前為止,LRP的功能尚未完全清楚。LRP具有脂蛋白受體的以下特性:①攝取含ApoE的β-VLDL,攝取量與脂蛋白中ApoE含量有關(guān);②ApoE存在時(shí),LRP作用可促進(jìn)脂蛋白的攝。虎跮RP機(jī)能不受細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的調(diào)節(jié);④抑制含ApoC群的脂蛋白攝取,從而阻礙脂蛋白攝取。細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量不受下調(diào)作用的影響,是動(dòng)脈粥樣硬化灶中泡沫細(xì)胞生成的重要條件。LRP是信賴于Ca++的蛋白質(zhì),與配體結(jié)合需要Ca++的存在。
有報(bào)道,LRP可結(jié)合含ApoE的脂蛋白,并協(xié)同LPL的催化作用。LDL受體缺乏者,LRP起有重要作用。Kowdl和Beisiegel等報(bào)道,乳糜微粒殘粒和β-VLDL均可被LRP識別;β-VLDL既可與LDL受體結(jié)合,又可與LRP結(jié)合;α2M也可作為配體與LRP結(jié)合,β-VLDL可抑制對α2M的攝取,以促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯的形成。α2M可與絲m.payment-defi.com/wszg/氨酸蛋白酶等多種蛋白質(zhì)分解酶結(jié)合成復(fù)合物,并可經(jīng)巨噬細(xì)胞膜上的α2M受體識別而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),LRP則可抑制這種結(jié)合作用。LRP還可以抑制α2M與TGF-β、b-FGF、IL-Iβ和IL-b等細(xì)胞因子的結(jié)合作用。據(jù)此推測。分子結(jié)構(gòu)與α2M受體蛋白為同一物質(zhì)。利用精制的鼠肝細(xì)胞膜部分m.payment-defi.com/zhuyuan/實(shí)驗(yàn)觀察到,利用LDL受體缺乏的成纖維細(xì)胞實(shí)驗(yàn),β-VLDL可競爭性抑制對α2M的攝取,α2M又可抑制乳糜微粒殘粒的攝取。實(shí)驗(yàn)表明,LRP可能既是乳糜粒殘粒受體,又是α2M受體之一。
經(jīng)單克隆抗體免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測,LRP蛋白質(zhì)的mRNA在肝臟、肺、腦、小腸和肌肉等組織存在,與LDL受體比較,肝臟的LRp mRNA的量約有10倍之多。通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和免疫組織化學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),在動(dòng)脈粥樣硬化巢病變組織里,LRP含量迅速增加,并發(fā)現(xiàn)內(nèi)膜的粥樣硬化巢里由平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變的泡沫化細(xì)胞中同樣也有LRP的存在。