一)根據物質溶解度差別進行分離
�。�1)結晶及重結晶方法
判斷結晶純度的方法有：
a.晶型均一，色澤均勻醫(yī)。學教育網原創(chuàng)。
b.有一定的熔點和較小的溶距，熔距應在2℃以內。
c.TLC或PC分別用三種以上溶劑系統(tǒng)檢識，呈現單一圓整斑點。
d.HPLC或GC檢查呈現單峰。 www.med126.com
�。�2)沉淀法
水提醇沉法（除去多糖或蛋白質)
醇提水沉法（除去樹脂或葉綠素)
醇提乙醚沉淀或丙酮沉淀法（使皂甙沉淀析出)
�。�3)pH法
酸提堿沉法（使生物堿類成分沉淀)
堿提酸沉法（使黃酮、蒽醌等成分沉淀)
等電點法（使蛋白質沉淀)
�。�4)鹽類沉淀法：
�。ǘ�)根據物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離
1.液-液萃取與分配系數K值
2.分離難易與分離因子β
3.分配比與pH
4.紙色譜
5.分配柱色譜
�。ㄈ�)根據物質的吸附性差別進行分離
1.物理吸附基本規(guī)律—相似者易于吸附
�。�1)對極性物質具有較強的親和能力。故極性強的溶質將被優(yōu)先吸附。
�。�2)溶劑極性越弱，則吸附劑對溶質的吸附能力越強。溶劑極性增強，則吸附劑對溶質的吸附能力減弱。
�。�3)溶質即使被硅膠、氧化鋁吸附，但加入極性較強的溶劑時，又可被后者置換洗脫出來。
活性炭因為是非極性吸附劑，故與硅膠、氧化鋁相反。
2.極性及其強弱判斷
�。�1)官能團的極性強弱按下列表達順序排列：
RCOOH ＞ Ar-OH ＞＞、RNHR ＞ RC=O ＞ R-O-R ＞ RH（2)化合物的極性由分子中所含官能團決定。
3.吸附色譜法應用
�。�1)硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過程中，吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、難以分離者，吸附劑用量可適當提高至樣品量的100-200倍。
（2)硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利于樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。 醫(yī)學全.在線.網.站.提供
�。�3)洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
�。�4)為避免發(fā)生化學吸附，酸性物質宜用硅膠，堿性物質則宜用氧化鋁進行分離。
4.聚酰胺吸附色譜法
�。�1)聚酰胺的性質及吸附原理
�、� 形成氫鍵的基團數目越多，吸附能力越強。
② 成鍵位置對吸附力也有影響。易形成分于內氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對減弱。
③ 分子中芳香化程度高者，則吸附性增強；反之，則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強，可大致排列成下列順序；水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
�。�2)聚酰胺色譜的應用
5.大孔吸附樹脂
�。�1)大孔吸附樹脂的吸附原理
大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結合的分子材料。吸附性是由于范德華引力或產生氫鍵的結果，分子篩性是由于其本身多孔性結構所決定的。
�。�2)影響吸附的因素
大孔吸附樹脂本身的性質、溶劑的性質和化合物的性質是影響吸附的3個重要因素。
�。�3)大孔吸附樹脂的應用
苷與糖類的分離，生物堿的精制，多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
�。�4)洗脫液的選擇
洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
�。ㄋ�)根據物質分子大小進行分離
物質分子大小不同的化合物可用透析法、凝膠過濾法、超濾法、超速離心法等分離。
1.凝膠過濾法
凝膠的種類：常用的有葡聚糖凝膠（Sepadex-G)醫(yī).學.全.在線.網.站.提供以及羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex-LH-20)。
2.膜過濾法
膜過濾法主要包括滲透、反滲透、超濾、電滲析、透析、液膜技術等。透析法多用于水溶性的大分子和小分子物質的分離，如蛋白質、酶、多糖分離過程中的脫鹽。按照孔徑大小，可將透析膜分為：微濾膜、超濾膜、反滲透膜、納米膜。
（五)根據物質解離程度不同進行分離
離子交換樹脂的種類：陽離子（強酸型和弱酸型)交換樹脂和陰離子（強堿型和弱堿型)交換樹脂。
