1.2 方法
1.2.1 免疫組化SP法 石蠟標(biāo)本做4?μm厚切片,常規(guī)脫蠟脫水,3%H2O2室溫下孵育15?min以封閉內(nèi)源性過氧化物酶,PBS沖洗每次5?min,洗3次。將切片置于枸櫞酸緩沖液(pH6.0)中,高壓鍋內(nèi)煮沸2?min?修復(fù)抗原,冷卻至室溫,PBS沖洗每次5?min,洗3次。滴加一抗,4?℃過夜,PBS沖洗每次5?min,洗3次,滴加生物素化的二抗工作液,37?℃下孵育30?min,PBS沖洗每次5?min,沖洗3次,滴加鏈酶親和素過氧化物酶復(fù)合體(三抗),37?℃下孵育30?min,蒸餾水沖洗每次5?min,洗3次。DAB顯色,蘇木素復(fù)染,中性樹膠封片,PBS代替一抗做陰性對照。
1.2.2 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 結(jié)果判定采用半定量積分法[1],染色高于背景非特異染色為陽性。根據(jù)每張切片的陽性細(xì)胞比例及著色深淺積分,著色細(xì)胞比例1/3為1分,1/3~2/3為2分,2/3以上為3分。著色程度,無著色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分。然后根據(jù)二者乘積判定陽性等級,0分為(-),1~2分為(+),3~4分為(++),4分以上為(+++)。其中(++)~(+++)為陽性組,(-)~(+)為陰性組醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站m.payment-defi.com。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析均使用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS13.0處理,組間陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法檢驗(yàn); P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
Galectin3表達(dá)定位于胞漿及胞核,以胞漿為主,未見單獨(dú)的胞核染色。
2.1 肺原發(fā)性腺癌Galectin3表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系 見表1。絕大多數(shù)肺原發(fā)性腺癌中Galectin3?呈高表達(dá),見圖1。32例胞漿表達(dá)陽性(92.1%),其中12例胞核表達(dá)陽性(31.7%)。伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Galectin3核陽性率為48.5%高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者13.3%(P=0.03),在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期標(biāo)本中Galectin3的核陽性率分別為3.8%、44.0%、66.7%(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ期標(biāo)本核陽性率與Ⅰ期相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05),但Ⅱ、Ⅲ期核陽性率相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.197)。nGalectin3(胞漿,n)-+P值-+P值35332 ≤60282261.00012200.62829029 女345290.09223110.911淋巴轉(zhuǎn)移33231 無303270.91216260.0301411310 中322300.788230.620 高1721510臨床分期 Ⅰ2632225 Ⅱ252220.4601411<0.05 Ⅲ12012肺原發(fā)性腺癌Galectin3胞漿、胞核均呈陽性表達(dá)(SP法,×200)
Fig.1 Primary lung adenocarcinoma showed a diffuse and strong cytoplasmic and a nuclear staining of galectin3 (SP,×200)
2.2 Galectin3在胸膜轉(zhuǎn)移性腺癌中的表達(dá)情況 見表2。Galectin3呈彌漫性、棕黃色或棕褐色表達(dá),見圖2。33例胞漿陽性(97.1%),其中29例胞核表達(dá)陽性(85.3%)。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胸膜轉(zhuǎn)移性腺癌中Galectin3在胞核、胞漿中表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.059、0.382)。
2.3 胸膜轉(zhuǎn)移性腺癌與肺原發(fā)性腺癌Galectin3表達(dá)胞漿陽性率無明顯差異(P=0.594),但是,核表達(dá)陽?性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。
3 討 論