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1 資料和方法
1.1 一般資料
SPA400型原子力顯微鏡(日本精工公司);3000HS型Zetasizer分析儀(英國(guó)Malvern公司);vc 130型探頭式超聲處理機(jī)(美國(guó)Sonics&Materials公司);DU800型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) (德國(guó)Beckman公司);Re300型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(英國(guó)Stuart公司)，卡瓦(陜西三原天域生物制品有限公司提煉廠);大豆磷脂(美國(guó)Avanti公司) ;膽固醇(美國(guó)sigma公司);Sephadex G75(Pharmacia);其余試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)中用水均為超純水。
1.2 方法
1.2.1 卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒的制備與表征 參照文獻(xiàn)[5]方法，并加以改進(jìn)。稱取卡瓦油10 mg、膽固醇40 mg、大豆磷脂100 mg置于圓底燒瓶中，加入體積比為5∶1的氯仿與乙醇混合液15mL溶解，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上減壓蒸發(fā)除去氯仿和乙醇。加入60g/L葡萄糖液5 mL作為分散介質(zhì)，得脂質(zhì)體初混液，冰水浴超聲10 min，制備包載卡瓦的脂質(zhì)體納米制劑。取少許顆粒加水混勻稀釋，取樣滴于云母片上，自然干燥后，利用原子力顯微鏡表征脂質(zhì)體納米顆粒形貌。載藥的脂質(zhì)體納米顆粒的平均粒徑、粒度分布、多分散系數(shù)以及Zeta電位通過(guò)Malvren Zetasizer 3000HS分析儀測(cè)定。
1.2.2 卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒包封率的測(cè)定 (1)紫外光譜掃描：將卡瓦油、卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒和空白脂質(zhì)體分別用甲醇水混合液溶解稀釋后，在300～500nm處掃描，卡瓦油、卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒在360nm處有強(qiáng)吸收，空白脂質(zhì)體在該波長(zhǎng)范圍無(wú)吸收。(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：用甲醇配制60、50、40、30、20和10μg/mL卡瓦溶液，在300～500nm處掃描，以360nm處的吸光度值及對(duì)應(yīng)的濃度線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(3)包封率測(cè)定：移取卡瓦納米制劑1mL過(guò)Sephadex G75柱分離(以超純水為洗脫劑)，收集脂質(zhì)體餾分，加入甲醇溶解并定容，測(cè)定吸光度值(條件同標(biāo)準(zhǔn)曲線)，計(jì)算卡瓦含量。另取對(duì)應(yīng)的卡瓦納米制劑1mL直接加入甲醇溶解后測(cè)定卡瓦的含量。兩者相除得包封率。
1.2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)考察 將制備的卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒于4℃密封儲(chǔ)存60d。每隔20d檢查納米制劑的外觀形態(tài)、平均粒徑、Zeta電位、多分散指數(shù)和包封率。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差
2 結(jié)果醫(yī).學(xué).全.在.線m.payment-defi.com
2.1 卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒的特性表征
本文制備的卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒為淺黃色的物質(zhì)，Zeta電位為(-33.9±2.3)mV，脂質(zhì)體納米顆粒的原子力圖見(jiàn)圖1，制備出來(lái)的脂質(zhì)體納米顆粒都為較完整的球形，分散性好，顆粒粒徑較均勻。顆粒的平均粒徑為(99.7±7.6)nm，多分散系數(shù)為0.321±0.011，粒徑分布如圖2所示，粒徑分布范圍較窄，粒徑分布范圍為(13～199)nm，其中小于67nm占97%，顆粒大小基本上與原子力圖吻合。
圖1 卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒的原子力圖
2.2 包封率
2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 不同濃度卡瓦溶液對(duì)應(yīng)的吸收光譜如圖3所示。以360nm處吸光度值(A)及對(duì)應(yīng)的濃度(c)作線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖4，標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：c(μg/mL)=50.3A-0.0196，γ=0.9993。
圖2 卡瓦脂質(zhì)體納米顆粒的粒徑分布圖 圖3 不同濃度的卡瓦溶液對(duì)應(yīng)吸收光譜圖 圖4 卡瓦標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.2.2 包封率測(cè)定 脂質(zhì)體納米顆粒對(duì)脂溶性藥物的包封率較高，達(dá)到(83.32±0.34)%。
