炔雌醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定炔雌醇的含量。

本方法適用炔雌醇。

供試品制成無水乙醇溶液，加入內(nèi)標(biāo)溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長281nm處檢測炔雌醇（C₂₀H₂₄O₂)和內(nèi)標(biāo)醋酸甲地孕酮的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇

2.水

3.無水乙醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按炔雌醇峰計算應(yīng)不低于 1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋水= 70＋30

2.2 檢測波長：281nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

稱取本品40mg，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取炔雌醇對照品適量，以無水乙醇溶解，即得對照品溶液。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取醋酸甲地孕酮20mg，精密稱定，置10mL量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置于5mL量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10μL 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處測定炔雌醇和內(nèi)標(biāo)的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計算，即得。另取炔雌醇對照品溶液，同法測定。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p359。