方法名稱:
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方法名稱: |
廣防風(fēng)顆粒—廣防風(fēng)苷A測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定廣防風(fēng)苷A的含量 本方法適用于廣防風(fēng)(Epimeredi indica(L.) Rothmalex)根單味中藥制成的顆粒。 |
方法原理: |
采用高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定廣防風(fēng)顆粒中的廣防風(fēng)苷A含量。 |
試劑: |
1. 乙腈為色譜純; 2. 甲醇 3. 廣防風(fēng)苷A對(duì)照品(自制) |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 液相色譜儀 1.2 紫外檢測(cè)器 1.3 色譜柱Discovery C18色譜柱(250mm×4.6mm) 1.4. 電子分析天平 2 試驗(yàn)條件 2.1流動(dòng)相∶乙腈+水=27+73 2.2 流速:1.0ml·min-1, 2.3 檢測(cè)波長(zhǎng):320nm 2.4 柱溫:室溫 2.5 系統(tǒng)適應(yīng)性: 理論塔板數(shù)以廣防風(fēng)苷A峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;分離度均大于1.5。 |
試樣制備: |
1.照品溶液的制備 精密稱取廣防風(fēng)苷A對(duì)照品(80℃干燥至恒重)5mg,加甲醇超聲溶解,定容至25mL,作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照液各0.4,0.8,1.2mL,1.6,2.0mL,分別用甲醇定容至2mL,搖勻,得濃度分別為39.6,79.2,118.8, 158.4,198μg·mL-1的廣防風(fēng)苷A標(biāo)準(zhǔn)液。 2.供試品溶液的制備 精密稱取廣防風(fēng)顆粒1.17g,加水超聲溶解,定容至10mL,取溶液于13000r·min-1下離心10min,上清液作為供試樣品溶液。 |
操作步驟: |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 在上述色譜條件下,各進(jìn)樣20μL。以峰面積(y)為縱坐標(biāo),廣防風(fēng)苷A的濃度(x)為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,計(jì)算回歸方程Y=20.139X- 154.35;r=0.9994;),線性范圍:0.792~3.960μg。 2.樣品測(cè)定 取供試品溶液適量,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
參考文獻(xiàn): |
王玉蘭,施華衛(wèi),欒欣,HPLC測(cè)定廣防風(fēng)顆粒中廣防風(fēng)苷A的含量, 中成藥,2004,26(5):428~429 |